四尾柵藻具有環(huán)境適應能力強和生長速度快等優(yōu)點，如果能將其進行品種改良，提高含油量，有望解決微藻生物柴油產業(yè)化進程的瓶頸。研究人員利用基因工程技術將油料作物紫蘇DGAT1基因導入四尾柵藻，獲得轉基因的產油微藻，利用地熱廢水培養(yǎng)，不僅能生產生物柴油，還能治理地熱廢水。操作過程如下圖，請回答下列問題：
注：LacZ基因編碼產生的酶可以分解物質X-gal,從而使菌落顯現出藍色。若無該基因或該基因被破壞，則菌落呈白色。
（1）將質粒pMD19-DGAT1導入大腸桿菌前，通常先用Ca2+處理大腸桿菌，使細胞處于一種 能吸收周圍環(huán)境中DNA分子能吸收周圍環(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài)。
（2）圖中接種大腸桿菌的培養(yǎng)基pH一般為 中性或弱堿性中性或弱堿性。為了便于重組質粒的篩選，該選擇培養(yǎng)基中應添加 氨芐青霉素和X-gal氨芐青霉素和X-gal。導入 沒有連接目的基因的質粒（或空質粒；或pMD19質粒）沒有連接目的基因的質粒（或空質粒；或pMD19質粒）的大腸桿菌菌落成藍色，導入 重組質粒（或pMD19-DGAT1質粒）重組質粒（或pMD19-DGAT1質粒）的大腸桿菌菌落成白色。
（3）由上圖推測，用 BamHⅠBamHⅠ和 XbaⅠXbaⅠ酶切割pMD19-DGAT1獲得 DGAT1基因，并與酶切后的載體pBI121連接再次構建基因表達載體，用這兩種酶切割的目的是 保證其準確插入質粒并防止其出現自身環(huán)化等問題（或防止反向連接和自身環(huán)化）保證其準確插入質粒并防止其出現自身環(huán)化等問題（或防止反向連接和自身環(huán)化）。
（4）為檢測轉基因四尾柵藻對地熱廢水的去污能力，研究人員設計實驗并得到相應實驗結果如表。
| 指標 | 總氮（mg/L） | 總磷（mg/L） | 氟化物（mg/L） |
| 廢水培養(yǎng)基 | 23.2 | 4.32 | 4.56 |
| 培養(yǎng)轉基因四尾柵藻11天后 | 1.9 | 0.45 | 0.84 |
應添加對照組：廢水培養(yǎng)非轉基因四尾柵藻11天后，檢測總氮、總磷和氟化物的含量
應添加對照組：廢水培養(yǎng)非轉基因四尾柵藻11天后，檢測總氮、總磷和氟化物的含量
。【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】能吸收周圍環(huán)境中DNA分子；中性或弱堿性；氨芐青霉素和X-gal；沒有連接目的基因的質粒（或空質粒；或pMD19質粒）；重組質粒（或pMD19-DGAT1質粒）；BamHⅠ；XbaⅠ；保證其準確插入質粒并防止其出現自身環(huán)化等問題（或防止反向連接和自身環(huán)化）；應添加對照組：廢水培養(yǎng)非轉基因四尾柵藻11天后，檢測總氮、總磷和氟化物的含量
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：32引用：2難度：0.6
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（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得。基因文庫包括和。
（2）生物體細胞內的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質酶基因和質粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉基因植株（幾丁質酶基因已經整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6
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