自生固氮菌是土壤中能獨立固定空氣中N2的細菌,將玉米種子用自生固氮菌拌種后播種,可顯著提高產(chǎn)量并降低化肥的使用量??蒲腥藛T進行了土壤中自生固氮菌的分離和固氮能力測定的研究,部分實驗流程如圖。請回答下列問題:
(1)步驟①土樣應(yīng)取自當(dāng)?shù)?表層表層(填“表層”或“深層”)土壤;步驟②需充分振蕩20 min,主要目的是 使土壤中的微生物充分釋放到無菌水中使土壤中的微生物充分釋放到無菌水中;步驟③將土壤懸浮液稀釋了 10001000倍。
(2)下列為兩種培養(yǎng)基的配方,步驟④應(yīng)選其中的 AshbyAshby培養(yǎng)基,并加入瓊脂后進行高壓蒸汽滅菌、倒平板。純化培養(yǎng)時,需同時進行未接種培養(yǎng)基的培養(yǎng),目的是 檢測培養(yǎng)過程中培養(yǎng)基是否被雜菌污染檢測培養(yǎng)過程中培養(yǎng)基是否被雜菌污染。
Ashby培養(yǎng)基:甘露醇(C6H14O6) 10g,KH2PO40.2g,MgSO4?7H2O0.2g,NaCl0.2g,K2SO40.3g,CaCO35g,蒸餾水1000mL。
LB培養(yǎng)基:蛋白胨10g,酵母膏5g,NaCl10g,蒸餾水1000mL,pH7.0~7.2。
(3)將純化的固氮菌置于完全培養(yǎng)液中擴大培養(yǎng)48h,經(jīng)離心后收集下層細胞并轉(zhuǎn)移至箱定培養(yǎng)基中進行固氮能力的測定,篩選出固氮能力最強的菌種CM12,為進一步鑒定其固氮能力,科研人員選用發(fā)芽一致的玉米種子進行3組盆栽實驗,30d后測定土壤微生物有機氮含量,結(jié)果如圖2。N:尿素處理組[每盆土壤中澆灌50mL有氮全營養(yǎng)液(在1000mL無氮植物營養(yǎng)液中加入0.12g尿素)];CM12:自生固氮菌CM12處理組(每盆土壤澆灌50mL接種自身固氮菌的無氮植物營養(yǎng)液)。
①對照組(CK)的處理為 每盆土壤澆50mL無氮植物營養(yǎng)液每盆土壤澆50mL無氮植物營養(yǎng)液。
②實驗結(jié)果表明,用尿素處理和接種固氮菌CM12處理均能顯著增加土壤微生物有機氮含量。與尿素處理組相比,CM12處理組土壤微生物有機氮含量增加了約 83.383.3(保留1位小數(shù))%。
③自生固氮菌較共生固氮菌(如根瘤菌)的應(yīng)用范圍更廣,原因是 自生固氮菌能在土壤中獨立固氮,不受宿主的限制自生固氮菌能在土壤中獨立固氮,不受宿主的限制。
【答案】表層;使土壤中的微生物充分釋放到無菌水中;1000;Ashby;檢測培養(yǎng)過程中培養(yǎng)基是否被雜菌污染;每盆土壤澆50mL無氮植物營養(yǎng)液;83.3;自生固氮菌能在土壤中獨立固氮,不受宿主的限制
【解答】
【點評】
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A.細胞膜 B.核糖體 C.?dāng)M核 D.莢膜
(2)表中培養(yǎng)液pH均為6.0,若對SM01中阿拉伯膠降解酶的活力進行測定,則應(yīng)選用表中的
①缺少
②具有
③缺乏
表 試驗用培養(yǎng)液配方培養(yǎng)液 阿拉伯膠 阿拉伯膠酶 NaNO3 牛肉膏 K2SOPO4 MgSO4?7H2O KCl FeSO4?7H2O
A
25g/L__ __ __
g/L
g/L
g/Lg/L B
25g/L
g/L__
g/L
g/L
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g/LC __ __
g/L__
g/L
g/L
g/L
g/LD
25g/L__
g/L__
g/L
g/L
g/L
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