為獲得具有抗玉米螟、抗除草劑草甘膦和抗旱性狀的優(yōu)良轉(zhuǎn)基因玉米,科研人員把重組到同一植物表達載體的cry1ACM、epsps、GTA和ZmPIS轉(zhuǎn)入植株,獲得轉(zhuǎn)基因植株。其中cry1AcM是抗玉米螟基因,epsps和GAT兩個基因同時發(fā)揮作用時,能有效提高玉米植株抗御草甘膦的能力,ZmPIS是抗旱基因。通過逐代除草劑篩選、分子檢測和抗蟲性鑒定,從大量轉(zhuǎn)基因株系中優(yōu)選出優(yōu)良玉米株系。構(gòu)建的基因表達載體部分示意圖如圖,請回答下列問題:
(1)構(gòu)建基因表達載體時,需要的工具酶有限制酶和DNA連接酶限制酶和DNA連接酶。根據(jù)基因表達載體的結(jié)構(gòu)組成分析,pUbi和P35S是啟動子啟動子,其功能是RNA聚合酶識別并結(jié)合的位點,驅(qū)動轉(zhuǎn)錄的進行RNA聚合酶識別并結(jié)合的位點,驅(qū)動轉(zhuǎn)錄的進行。
(2)將基因表達載體導(dǎo)入玉米受體細胞中最常用的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法,玉米細胞經(jīng)植物組培獲得植株,待植株長出新葉后噴灑含除草劑草甘膦除草劑草甘膦的水溶液,選取存活植株移栽到溫室,以獲得具有除草劑抗性的植株。
(3)為檢測抗旱基因是否導(dǎo)入玉米細胞,可采用DNA分子雜交DNA分子雜交技術(shù)進行檢測。除此之外也可采用PCR技術(shù)進行檢測,在PCR反應(yīng)體系中,應(yīng)加入待測玉米細胞的基因組DNA基因組DNA,抗旱基因的22種引物、dNTP等物質(zhì),若擴增后進行電泳時出現(xiàn)陽性反應(yīng),則導(dǎo)入成功。
【考點】基因工程的操作過程綜合.
【答案】限制酶和DNA連接酶;啟動子;RNA聚合酶識別并結(jié)合的位點,驅(qū)動轉(zhuǎn)錄的進行;農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法;除草劑草甘膦;DNA分子雜交;基因組DNA;2
【解答】
【點評】
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