如圖為利用基因工程生產(chǎn)乙肝疫苗的過(guò)程，質(zhì)粒上箭頭所指部位為相應(yīng)的限制酶切割位點(diǎn)。質(zhì)粒中l(wèi)acZ基因編碼產(chǎn)生的酶可以分解培養(yǎng)基中的XgaⅠ，產(chǎn)生藍(lán)色物質(zhì)，使菌落呈現(xiàn)藍(lán)色，否則菌落為白色?；卮鹣铝袉?wèn)題：
（1）利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時(shí)需要的酶為

耐高溫DNA 聚合酶

耐高溫DNA 聚合酶

；此過(guò)程還需要引物，其作用是

使DNA聚合酶能夠從引物的3'端開(kāi)始連接脫氧核苷酸

使DNA聚合酶能夠從引物的3'端開(kāi)始連接脫氧核苷酸

，若將1個(gè)目的基因擴(kuò)增n次，則需要引物

2（2ⁿ-1）

2（2ⁿ-1）

個(gè)。
（2）①過(guò)程為了防止目的基因與質(zhì)粒任意連接，應(yīng)選擇

EcoR I、BamH I

EcoR I、BamH I

限制酶分別切割目的基因和質(zhì)粒，并將切割后的質(zhì)粒和目的基因用

DNA連接

DNA連接

酶連接形成重組質(zhì)粒，該重組質(zhì)粒除了含有目的基因和標(biāo)記基因外，還應(yīng)含有

啟動(dòng)子、終止子

啟動(dòng)子、終止子

（寫(xiě)出2點(diǎn)）等結(jié)構(gòu)。
（3）過(guò)程②一般用

Ca²⁺

Ca²⁺

處理大腸桿菌。為了篩選成功導(dǎo)入重組質(zhì)粒的大腸桿菌，可將大腸桿菌接種到含有

X-gal和青霉素

X-gal和青霉素

的固體培養(yǎng)基上，挑選顏色為

白色

白色

（填“藍(lán)色”或“白色”）的菌落進(jìn)一步培養(yǎng)。
（4）除圖示方法外，還可利用乳腺生物反應(yīng)器生產(chǎn)乙肝疫苗，該過(guò)程需要將目的基因與

乳腺中特異表達(dá)的基因

乳腺中特異表達(dá)的基因

啟動(dòng)子相連，并通過(guò)

顯微注射

顯微注射

方法將重組質(zhì)粒導(dǎo)入到動(dòng)物的受精卵中，由這個(gè)受精卵發(fā)育成的轉(zhuǎn)基因動(dòng)物進(jìn)入泌乳期后，通過(guò)分泌乳汁即可獲得乙肝抗原蛋白。