某種熒光蛋白（GFP）在紫外光或藍(lán)光激發(fā)下會(huì)發(fā)出綠色熒光，這一特性可用于檢測(cè)細(xì)胞中目的基因的表達(dá)。某科研團(tuán)隊(duì)將某種病毒的外殼蛋白（L₁）基因連接在GFP基因的5′末端，獲得了L₁-GFP融合基因（簡稱為甲），并將其插入質(zhì)粒P₀，構(gòu)建了真核表達(dá)載體P₁，其部分結(jié)構(gòu)和酶切位點(diǎn)的示意圖如圖，圖中E₁～E₄四種限制酶產(chǎn)生的黏性末端各不相同。

回答下列問題：
（1）該團(tuán)隊(duì)在將甲插入質(zhì)粒P₀時(shí)，使用了

限制酶

限制酶

和

DNA連接

DNA連接

酶，質(zhì)粒P₀作為

運(yùn)載體

運(yùn)載體

起作用。
（2）將P₁轉(zhuǎn)入體外培養(yǎng)的牛皮膚細(xì)胞后，若在該細(xì)胞中觀察到了綠色熒光，則說明L₁基因在牛的皮膚細(xì)胞中完成了

轉(zhuǎn)錄

轉(zhuǎn)錄

和

翻譯

翻譯

過程。
（3）為了獲得含有甲的牛，該團(tuán)隊(duì)需要做的工作包括：將能夠產(chǎn)生綠色熒光細(xì)胞的

細(xì)胞核

細(xì)胞核

移入牛的

去核卵母細(xì)胞

去核卵母細(xì)胞

中、體外培養(yǎng)、胚胎移植等。
（4）為了檢測(cè)甲是否存在于克隆牛的不同組織細(xì)胞中，某同學(xué)用PCR方法進(jìn)行鑒定。在鑒定時(shí)應(yīng)分別以該牛不同組織細(xì)胞中的

核DNA

核DNA

（填“mRNA”“總RNA”或“核DNA”）作為PCR模板。