針對(duì)病毒的疫苗有重組蛋白疫苗、核酸疫苗（包括DNA疫苗和RNA疫苗）等。如圖為其中某病毒一種疫苗的研發(fā)思路，圖中①～⑦表示過(guò)程，B圖中箭頭指示NcoⅠ、SphⅠ、NheⅠ、BamHⅠ的酶切位點(diǎn)（四種酶的識(shí)別序列詳見表），標(biāo)記基因SUC2控制合成蔗糖酶，使P型酵母菌能利用培養(yǎng)基中的蔗糖生存。

限制酶	NeoⅠ	SphⅠ	NheⅠ	BamHⅠ
識(shí)別序列和切割位點(diǎn)	C↓CATGGG	CATG↓C	G↓GATCC	G↓CTAGC

（1）圖中①過(guò)程需要先通過(guò)

逆轉(zhuǎn)錄

逆轉(zhuǎn)錄

過(guò)程得到cDNA，再利用PCR擴(kuò)增S基因，若擴(kuò)增5個(gè)循環(huán)，則需要引物

62

62

個(gè)。
（2）為使③過(guò)程順利進(jìn)行，需先使用限制藥

NcoⅠ

NcoⅠ

和

NheⅠ

NheⅠ

切割質(zhì)粒B。
（3）為達(dá)到利用標(biāo)記基因篩選的目的，非轉(zhuǎn)基因的普通P型酵母菌應(yīng)該滿足的條件是

自身不能合成蔗糖酶

自身不能合成蔗糖酶

。
（4）重組疫苗注入志愿者體內(nèi)后，S蛋白基因指導(dǎo)合成的S蛋白作

抗原

抗原

。刺激機(jī)體產(chǎn)生能與之相結(jié)合的抗體，抗體的分泌量可作為檢測(cè)疫苗對(duì)志愿者免疫效果的指標(biāo)，參加臨床試驗(yàn)的志愿者需要滿足的條件之一是

無(wú)

無(wú)

（填“有”或“無(wú)”）該病毒感染史。