科研人員將酵母菌的海藻糖合成酶(TPS)基因轉入小麥中,以期獲得具備抗旱特性的小麥。圖1表示載體和預期基因表達載體的結構(注:Bar基因是抗除草劑基因),圖2標注TPS基因的酶切位點以及引物結合的可能情況。
(1)PCR技術中的引物可以使DNA聚合酶能夠從引物的 3'3'端開始連接脫氧核苷酸,本實驗可選擇的引物組合為 2、32、3(用圖2中數(shù)字表示)。為了方便構建重組質粒,所用一對引物的一端需要分別加上 BamHⅠ、SacⅠBamHⅠ、SacⅠ酶(填圖1中限制酶的名稱)的識別序列。
(2)基因表達載體轉入細胞后,在獲得的植株葉片上涂抹除草劑,共獲得7株待測個體。現(xiàn)對篩選出的個體進行DNA水平的檢測。請?zhí)顚懕砀瘢瓿蓪嶒灒?br />
組別 | 植株編號1-7 | 對照組1 | 對照組2 |
模板 | 1-7植株DNA | ① TPS基因(基因表達載體) TPS基因(基因表達載體) |
普通小麥DNA |
PCR體系中其他物質 | 緩沖液(添加Mg2+)、水、引物、4種脫氧核苷酸、② 耐高溫的DNA聚合(或Taq) 耐高溫的DNA聚合(或Taq) 酶 |
||
電泳結果 | 編號1、2、4、5、7植株無條帶 編號3、6植株有條帶 |
有條帶 | ③ 無條帶 無條帶 |
不能
不能
(填“能”或“不能”)判定編號3、6植株轉基因抗旱小麥研制成功,原因是 還需進行TPS含量的檢測(還需進行轉錄、翻譯等分子水平的檢測等)
還需進行TPS含量的檢測(還需進行轉錄、翻譯等分子水平的檢測等)
。【考點】DNA片段的擴增與電泳鑒定.
【答案】3';2、3;BamHⅠ、SacⅠ;TPS基因(基因表達載體);耐高溫的DNA聚合(或Taq);無條帶;不能;還需進行TPS含量的檢測(還需進行轉錄、翻譯等分子水平的檢測等)
【解答】
【點評】
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發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:4引用:1難度:0.6
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1.數(shù)字PCR技術是一種核酸分子絕對定量技術,其原理如圖所示。下列有關敘述正確的是( ?。?img alt="菁優(yōu)網(wǎng)" src="https://img.jyeoo.net/quiz/images/202204/49/6d911ea3.png" style="vertical-align:middle" />
發(fā)布:2024/12/30 23:30:2組卷:6引用:2難度:0.6 -
2.PCR技術不僅可以擴增目的基因,還可用于定點誘變目的基因等。大引物PCR就是一種定點突變技術。大引物PCR需要用到引物進行兩次PCR,其操作步驟為:
①根據(jù)目的基因序列設計引物,得到兩個常規(guī)引物,分別為常規(guī)上游引物和常規(guī)下游引物;
②根據(jù)突變堿基所處序列位置設計突變上游引物,突變位點位于突變引物序列的中間位置
③由突變上游引物與常規(guī)下游引物進行第一次PCR反應得到下游大引物;
④用得到的下游大引物中和另一個常規(guī)上游引物進行第二次PCR擴增,得到突變目的基因序列?;卮鹣铝袉栴}:
(1)PCR擴增的第一步是使雙鏈模板DNA變性。DNA中G+C的含量與變性要求的溫度有關,DNA中G+C的含量越多,要求的變性溫度越高。其原因是
(2)在第一次PCR反應中,形成圖示雙鏈DNA至少要經(jīng)過
(3)如果要利用微生物進一步克隆PCR定點誘變產(chǎn)物,其步驟包括:發(fā)布:2024/12/30 23:0:2組卷:32引用:3難度:0.6 -
3.下列關于DNA片段擴增及其鑒定的說法錯誤的是( ?。?/h2>
發(fā)布:2024/12/30 23:30:2組卷:3引用:3難度:0.7
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