苯丙酮尿癥是一種單基因遺傳病，由于PKU某因突變導致患者尿液中含有大量苯丙酮酸。基因定點整合可替換特定某因用于該病治療，即將正常PKU基因定點整合到PKU基因突變的小鼠胚胎干細胞的染色體DNA上，替換突變基因。簡要過程如下圖所示。請回答下列問題：
注：圖中neoR為新霉素抗性基因，HB1和HB2為小鼠胚胎干細胞染色體DNA上突變的PKU基因兩側的一段DNA序列。
（1）構建重組載體時，需要根據(jù)HB1和HB2的堿基HB1和HB2的堿基序列分別合成HB1'和HB2'，在二者之間除了插入正常的PKU基因和neoR基因以外，還必須含有啟動于、終止子啟動于、終止子。此過程常用的工具酶有限制酶、DNA連接酶限制酶、DNA連接酶，neoR基因的作用是鑒定與篩選含有正常PKU基因的胚胎干細胞鑒定與篩選含有正常PKU基因的胚胎干細胞。
（2）可用顯微注射顯微注射技術將重組載體導入小鼠胚胎干細胞，誘導相應區(qū)域互換，完成胚胎干細胞的基因改造。胚胎干細胞的特點有能大量增殖；具有發(fā)育的全能性；體積小、細胞核大、核仁明顯；在體外培養(yǎng)條件下，可以增殖而不發(fā)生分能大量增殖；具有發(fā)育的全能性；體積小、細胞核大、核仁明顯；在體外培養(yǎng)條件下，可以增殖而不發(fā)生分（答出兩點即可）。
（3）現(xiàn)用完成基因改造后的胚胎干細胞進行個體生物學水平鑒定，寫出鑒定思路、結果及結論：將該胚胎干細胞培育成小鼠，檢測小鼠尿液中苯丙酮酸含量，若小鼠尿液中不含大量苯丙酮酸，說明PKU基因成功表達，基因治療成功，反之，則不成功將該胚胎干細胞培育成小鼠，檢測小鼠尿液中苯丙酮酸含量，若小鼠尿液中不含大量苯丙酮酸，說明PKU基因成功表達，基因治療成功，反之，則不成功。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】HB1和HB2的堿基；啟動于、終止子；限制酶、DNA連接酶；鑒定與篩選含有正常PKU基因的胚胎干細胞；顯微注射；能大量增殖；具有發(fā)育的全能性；體積小、細胞核大、核仁明顯；在體外培養(yǎng)條件下，可以增殖而不發(fā)生分；將該胚胎干細胞培育成小鼠，檢測小鼠尿液中苯丙酮酸含量，若小鼠尿液中不含大量苯丙酮酸，說明PKU基因成功表達，基因治療成功，反之，則不成功
【解答】
【點評】
聲明：本試題解析著作權屬菁優(yōu)網(wǎng)所有，未經(jīng)書面同意，不得復制發(fā)布。
發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：25引用：4難度：0.6
相似題
-
1．下列有關基因工程技術和蛋白質工程技術敘述正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．下列有關基因工程的敘述，正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7 -
3．幾丁質是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質酶可催化幾丁質水解。通過基因工程將幾丁質酶基因轉入植物體內，可增強其抗真菌病的能力。回答下列問題：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀?和。
（2）生物體細胞內的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質酶基因和質粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉基因植株（幾丁質酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6