回答與基因工程和植物克隆有關(guān)的問題：
（1）從水稻體細(xì)胞中提取總RNA，利用 逆轉(zhuǎn)錄逆轉(zhuǎn)錄酶獲得B基因編碼蛋白的序列，將該序列和Luc基因（表達(dá)的熒光素酶能催化熒光素產(chǎn)生熒光）連接成的融合基因必須連接到表達(dá)載體的啟動(dòng)子和終止子之間，其中啟動(dòng)子是 RNA聚合酶RNA聚合酶的結(jié)合位點(diǎn)。
（2）將重組載體導(dǎo)入農(nóng)桿菌時(shí)，常用氯化鈣處理農(nóng)桿菌的目的是 增加農(nóng)桿菌細(xì)胞壁的通透性增加農(nóng)桿菌細(xì)胞壁的通透性。處理后再將農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)移到適宜培養(yǎng)液中培養(yǎng)一段時(shí)間，目的是 使農(nóng)桿菌恢復(fù)正常生理狀態(tài)使農(nóng)桿菌恢復(fù)正常生理狀態(tài)。
（3）過程②利用了農(nóng)桿菌的T-DNA片段，將目的基因 整合（或轉(zhuǎn)移）整合（或轉(zhuǎn)移）到受體細(xì)胞的染色體DNA上，完成后需在培養(yǎng)基中添加 潮霉素潮霉素對水稻愈傷組織進(jìn)行脫菌處理。
（4）借助Luc基因的表達(dá)來完成第二次鑒定篩選，具體方法是 檢測加入熒光素的細(xì)胞中是否發(fā)出熒光檢測加入熒光素的細(xì)胞中是否發(fā)出熒光。
（5）在植物克隆中，盡量選擇 性狀優(yōu)良、細(xì)胞全能性表達(dá)充分性狀優(yōu)良、細(xì)胞全能性表達(dá)充分的基因型。有研究人員將上述水稻愈傷組織反復(fù)擴(kuò)增后再誘導(dǎo)，都以失敗告終，原因是在 多次繼代培養(yǎng)多次繼代培養(yǎng)后喪失細(xì)胞全能性的表達(dá)能力。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合．
【答案】逆轉(zhuǎn)錄；RNA聚合酶；增加農(nóng)桿菌細(xì)胞壁的通透性；使農(nóng)桿菌恢復(fù)正常生理狀態(tài)；整合（或轉(zhuǎn)移）；潮霉素；檢測加入熒光素的細(xì)胞中是否發(fā)出熒光；性狀優(yōu)良、細(xì)胞全能性表達(dá)充分；多次繼代培養(yǎng)
【解答】
【點(diǎn)評】
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發(fā)布：2024/9/27 11:0:2組卷：2引用：2難度：0.7
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1．下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強(qiáng)其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉栴}：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀?和。
（2）生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開始時(shí)，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時(shí)，使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個(gè)解鏈過程的共同點(diǎn)是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個(gè)DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時(shí)，DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是。
（4）提取RNA時(shí)，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6 -
3．下列有關(guān)基因工程的敘述，正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7