新型冠狀病凝肺炎(COVID-19)的病原體嚴(yán)重急性呼吸綜合征冠狀病毒2(SARS-CoV-2)是一種RNA病毒?;卮鹣铝袉栴}。
(1)SARS-CoV-2的基因組測序工作由我國科學(xué)家率先完成。為提高準(zhǔn)確率,檢測樣本中是否含有SARS-CoV-2,應(yīng)選擇其基因組中特有的BCBC(多選)的基因。
A.單個(gè)
B.多個(gè)
C.堿基序列穩(wěn)定
D.堿基序列易變
(2)檢測采集的樣本中是否含有SARS-CoV-2的步驟如下:
①利用樣本中獲取的RNA得到cDNA,該過程需要使用逆轉(zhuǎn)錄逆轉(zhuǎn)錄酶。
②利用PCR技術(shù)對(duì)上述cDNA進(jìn)行擴(kuò)增。PCR過程的原理是DNA復(fù)制DNA復(fù)制,該過程需要在一定的緩沖溶液中才能進(jìn)行,需提供DNA聚合酶、引物、模板和4種脫氧核苷酸模板和4種脫氧核苷酸,同時(shí)通過控制溫度使該過程在體外反復(fù)進(jìn)行。擴(kuò)增的過程包括變性、退火、延伸變性、退火、延伸。
③對(duì)擴(kuò)增后的cDNA進(jìn)行熒光檢測,過程如圖所示。DNA探針只能與特有的SARS-CoV-2基因中部分序列結(jié)合,DNA探針中R基團(tuán)發(fā)出的熒光會(huì)被距離很近的Q基團(tuán)吸收,不能發(fā)出熒光。在對(duì)結(jié)合有探針的cDNA擴(kuò)增過程中,DNA聚合酶會(huì)將遇到的探針?biāo)?,使DNA探針上R基團(tuán)與Q基團(tuán)分離,R基團(tuán)發(fā)出熒光。釋放到溶液中的R基團(tuán)達(dá)到一定量時(shí),才能檢測到發(fā)出的熒光。
樣本中不含病毒時(shí),檢測不到熒光的原因是探針無法和SARS-CoV-2基因中的序列結(jié)合,不會(huì)被水解,不會(huì)發(fā)出熒光探針無法和SARS-CoV-2基因中的序列結(jié)合,不會(huì)被水解,不會(huì)發(fā)出熒光。當(dāng)樣本中病毒含量較少時(shí),能檢測到熒光值所需的擴(kuò)增次數(shù)比病毒含量較多時(shí)多多(填“多”或“少”)。
【考點(diǎn)】DNA片段的擴(kuò)增與電泳鑒定;目的基因的篩選與獲取.
【答案】BC;逆轉(zhuǎn)錄;DNA復(fù)制;模板和4種脫氧核苷酸;變性、退火、延伸;探針無法和SARS-CoV-2基因中的序列結(jié)合,不會(huì)被水解,不會(huì)發(fā)出熒光;多
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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