PHB2蛋白具有抑制細(xì)胞增殖的作用。為探究PHB2蛋白抑制人宮頸癌細(xì)胞增殖的原因，研究者從基因數(shù)據(jù)庫中獲取了該蛋白的基因編碼序列（簡稱phb2基因），大小為0.9kb（lkb=1000堿基對），利用乳腺生物反應(yīng)器來表達(dá)該蛋白?；卮鹣铝袉栴}：
（1）為獲取phb2基因，提取該動物肝臟組織的總RNA，再經(jīng)

逆轉(zhuǎn)錄

逆轉(zhuǎn)錄

過程得到cDNA，以該cDNA為模板進(jìn)行PCR擴(kuò)增phb2基因，PCR需要的條件是

（成對的）引物，模板、四中脫氧核苷酸（dNTP）、耐高溫的DNA聚合酶（TaqDNA聚合酶）、緩沖液

（成對的）引物，模板、四中脫氧核苷酸（dNTP）、耐高溫的DNA聚合酶（TaqDNA聚合酶）、緩沖液

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（2）制備乳腺生物反應(yīng)器前，首先將獲得的Phb2基因與

乳腺中特異表達(dá)的基因的啟動子

乳腺中特異表達(dá)的基因的啟動子

等調(diào)控元作連接；通常需要在基因兩端引入產(chǎn)生不同黏性末端的限制酶切割位點(diǎn)序列再構(gòu)建出表達(dá)載體，這種方案的優(yōu)點(diǎn)是

防止目的基因和質(zhì)粒自身環(huán)化；使目的基因和載體正確（定向）連接

防止目的基因和質(zhì)粒自身環(huán)化；使目的基因和載體正確（定向）連接

；將構(gòu)建好的基因表達(dá)載體通過

顯微注射

顯微注射

技術(shù)注入到受精卵中，再將受精卵培養(yǎng)成早期胚胎移入受體獲得轉(zhuǎn)基因成功的動物。
（3）近來人們嘗試制備唾液腺生物反應(yīng)器來代替乳腺生物反應(yīng)器，與乳腺生物反應(yīng)器相比其優(yōu)點(diǎn)是

不受性別和（生長發(fā)育）時間限制

不受性別和（生長發(fā)育）時間限制

（至少兩點(diǎn)），結(jié)合乳腺生物反應(yīng)器的制備，簡單說明唾液腺生物反應(yīng)器制備過程

將phb2基因與唾液腺中特異表達(dá)的基因的啟動子連接，構(gòu)建出基因的表達(dá)載體導(dǎo)入受體細(xì)胞（受精卵），培養(yǎng)成早期胚胎移入受體

將phb2基因與唾液腺中特異表達(dá)的基因的啟動子連接，構(gòu)建出基因的表達(dá)載體導(dǎo)入受體細(xì)胞（受精卵），培養(yǎng)成早期胚胎移入受體

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