番茄在低溫下運(yùn)輸、儲(chǔ)存的過(guò)程中，容易出現(xiàn)凍傷，影響番茄的品質(zhì)?？茖W(xué)家利用基因工程技術(shù)將AFPs抗凍基因轉(zhuǎn)入番茄植株，培育抗凍番茄。如圖1表示構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí)所用載體，三種限制酶及酶切位點(diǎn)分別為：①BamHⅠ-G，GATCC-②Bgl∥-A，GATCT-③EcoRⅠ-G，AATTC-，請(qǐng)回答下列問(wèn)題：
（1）構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí)一般需要選用兩種不同的限制酶切割，目的是 防止載體、目的基因自身環(huán)化及目的基因反向連接防止載體、目的基因自身環(huán)化及目的基因反向連接。用限制酶切割質(zhì)粒后，可以使用 DNA連接DNA連接酶催化DNA片段上的磷酸二酯鍵的形成。
（2）在重組質(zhì)粒中，目的基因首端的啟動(dòng)子能夠與 RNA聚合酶RNA聚合酶結(jié)合，驅(qū)動(dòng)目的基因的轉(zhuǎn)錄。本實(shí)驗(yàn)應(yīng)選用 四環(huán)素抗性基因四環(huán)素抗性基因作為標(biāo)記基因。
（3）若目的基因用BamHI和BglⅡ剪切，質(zhì)粒用BamHI剪切，剪切后的目的基因和質(zhì)粒能連接在一起，原因是 BamHI和BglII切割得到的黏性末端相同BamHI和BglII切割得到的黏性末端相同酶切后的目的基因存在正向與反向兩種連接方式，可用 EcoRI和BamHIEcoRI和BamHI酶對(duì)兩種重組質(zhì)粒進(jìn)行剪切，通過(guò)凝膠電泳分析產(chǎn)物大小進(jìn)行區(qū)分（如圖2所示），圖中 樣品2樣品2（填“樣品1”或“樣品2”）為所需基因表達(dá)載體。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過(guò)程綜合．
【答案】防止載體、目的基因自身環(huán)化及目的基因反向連接；DNA連接；RNA聚合酶；四環(huán)素抗性基因；BamHI和BglII切割得到的黏性末端相同；EcoRI和BamHI；樣品2
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布：2024/5/22 8:0:8組卷：12引用：1難度：0.7
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1．下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過(guò)基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強(qiáng)其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉?wèn)題：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫(kù)中獲得?；蛭膸?kù)包括和。
（2）生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開(kāi)始時(shí)，解開(kāi)DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時(shí)，使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個(gè)解鏈過(guò)程的共同點(diǎn)是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個(gè)DNA片段連接起來(lái)的酶，常見(jiàn)的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時(shí)，DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是。
（4）提取RNA時(shí)，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒(méi)有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6 -
3．下列有關(guān)基因工程的敘述，正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7
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