研究人員利用小鼠的單倍體ES細(xì)胞(只有一個染色體組),成功培育出轉(zhuǎn)基因小鼠。其主要技術(shù)流程如圖1所示,請分析回答下列問題:
注:Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ代表四種限制酶。箭頭指向的位置為限制酶的切割位點(diǎn):Ampr是氨芐青霉素抗性基因,Neor是G418抗性基因。
(1)圖中細(xì)胞乙與 受精卵受精卵類似,圖中桑葚胚需通過 胚胎移植胚胎移植技術(shù)移入代孕小鼠子宮內(nèi)繼續(xù)發(fā)育,進(jìn)行該操作前需對受體小鼠進(jìn)行同期發(fā)情處理,目的是 使供、受體生殖器官的生理變化相同,為供體的胚胎移植入受體提供相同的生理環(huán)境使供、受體生殖器官的生理變化相同,為供體的胚胎移植入受體提供相同的生理環(huán)境。
(2)在基因工程操作步驟中,過程①②稱為 基因表達(dá)載體的構(gòu)建基因表達(dá)載體的構(gòu)建。已知氨芐青霉素不能有效殺死小鼠細(xì)胞,而一定濃度的G418能有效殺死不具有Neor的小鼠細(xì)胞。結(jié)合圖1推測,過程①選用的2種限制酶是 Ⅰ和ⅡⅠ和Ⅱ(填圖中的編號),③處的培養(yǎng)液應(yīng)添加 G418G418(填“氨芐青霉素”或“G418”)。
(3)基因工程對DNA的需求量較大,利用PCR技術(shù)可以大量擴(kuò)增目的基因。PCR反應(yīng)體系中除含緩沖液、模板DNA、dNTP(包含dATP、dCTP、dGTP、dTTP)、引物外,還應(yīng)含有 熱穩(wěn)定的DNA聚合酶(或TaqDNA聚合酶)熱穩(wěn)定的DNA聚合酶(或TaqDNA聚合酶);引物應(yīng)選用圖2中的 A和DA和D(填圖中字母)。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合.
【答案】受精卵;胚胎移植;使供、受體生殖器官的生理變化相同,為供體的胚胎移植入受體提供相同的生理環(huán)境;基因表達(dá)載體的構(gòu)建;Ⅰ和Ⅱ;G418;熱穩(wěn)定的DNA聚合酶(或TaqDNA聚合酶);A和D
【解答】
【點(diǎn)評】
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