研究者擬構(gòu)建高效篩選系統(tǒng)，將改進(jìn)的苯丙氨酸合成關(guān)鍵酶基因P1導(dǎo)入谷氨酸棒桿菌，以提高苯丙氨酸產(chǎn)量。
（1）如圖是該高效篩選系統(tǒng)載體的構(gòu)建過程。載體1中含有KanR（卡那霉素抗性基因）和SacB兩個(gè)標(biāo)記基因，為去除篩選效率較低的SacB，應(yīng)選擇引物 11和 44，并在引物的 5′5′（5′∕3′）端引入XhoⅠ酶識(shí)別序列，進(jìn)行PCR擴(kuò)增，產(chǎn)物經(jīng)酶切、連接后環(huán)化成載體2。
（2）PCR擴(kuò)增載體3中篩選效率較高的標(biāo)記基因RpsL（鏈霉素敏感基因）時(shí)，引物應(yīng)包含 XhoⅠXhoⅠ（EcoRⅠ∕HindⅢ∕XhoⅠ）酶識(shí)別序列，產(chǎn)物經(jīng)單酶切后連接到載體2構(gòu)建高效篩選載體4。
（3）將改進(jìn)的P1基因整合到載體4構(gòu)建載體5。將載體5導(dǎo)入鏈霉素不敏感（由RpsL突變?cè)斐桑?、卡那霉素敏感的受體菌。為獲得成功導(dǎo)入載體5的菌株，應(yīng)采用含有 卡那霉素卡那霉素的平板進(jìn)行初步篩選。
（4）用一定的方法篩選出如下菌株：P1基因脫離載體5并整合到受體菌擬核DNA，且載體5上其他DNA片段全部丟失。該菌的表型為 BB。
A．卡那霉素不敏感、鏈霉素敏感
B．卡那霉素敏感、鏈霉素不敏感
C．卡那霉素和鏈霉素都敏感
D．卡那霉素和鏈霉素都不敏感
（5）可采用 PCRPCR技術(shù)鑒定成功整合P1基因的菌株。之后以發(fā)酵法檢測(cè)苯丙氨酸產(chǎn)量。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合．
【答案】1；4；5′；XhoⅠ；卡那霉素；B；PCR
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布：2024/12/31 1:30:1組卷：229引用：5難度：0.5
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1．下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強(qiáng)其抗真菌病的能力。回答下列問題：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀?和。
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發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7
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