普通棉花中含β-甘露糖苷酶基因（GhMnaA2），其能在纖維細(xì)胞中特異性表達(dá)，產(chǎn)生的 β-甘露糖苷酶催化半纖維素降解，使棉纖維長度變短。為了培育新的棉花品種，科研人員構(gòu)建了反義GhMnaA2基因表達(dá)載體，利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將其導(dǎo)入棉花細(xì)胞，成功獲得轉(zhuǎn)基因棉花品種，具體過程如圖所示。請分析回答：
（1）①和②過程中所用的限制性核酸內(nèi)切酶分別為Hindlll和BamHIHindlll和BamHI、SmalSmal。
（2）過程①中纖維細(xì)胞E6啟動子在質(zhì)粒1上只以一種方向的相連，請解釋GhMnaA2基因在質(zhì)粒2上可以正向和反向兩種方向相連的原因是過程②中目的基因和質(zhì)粒形成相同的粘性末端過程②中目的基因和質(zhì)粒形成相同的粘性末端，這種操作的缺點是目的基因容易發(fā)生自身環(huán)化自身環(huán)化，從而影響與質(zhì)粒的拼接。
（3）基因表達(dá)載體除了圖示組成外，至少還有復(fù)制原點、終止子、標(biāo)記基因復(fù)制原點、終止子、標(biāo)記基因。
（4）過程③中需用CaCl2處理農(nóng)桿菌，目的是增加農(nóng)桿菌細(xì)胞壁的通透性增加農(nóng)桿菌細(xì)胞壁的通透性，從而使外源基因容易導(dǎo)入。
（5）過程④利用農(nóng)桿菌介導(dǎo)轉(zhuǎn)化棉花細(xì)胞的過程，整合到棉花細(xì)胞染色體DNA上去的區(qū)段是重組質(zhì)粒中的
T-DNAT-DNA部分，在植物組織培養(yǎng)前需要把與農(nóng)桿菌共培養(yǎng)后的外植體轉(zhuǎn)移到含有抗生素抗生素的培養(yǎng)基上進(jìn)行脫菌培養(yǎng)。
（6）導(dǎo)入棉花細(xì)胞內(nèi)的反義GhMnaA2基因轉(zhuǎn)錄形成的mRNA能與棉花細(xì)胞內(nèi)的GhMnaA2轉(zhuǎn)錄的mRNA互補配對與棉花細(xì)胞內(nèi)的GhMnaA2轉(zhuǎn)錄的mRNA互補配對從而阻止β-甘露糖苷酶β-甘露糖苷酶合成，使棉纖維更長。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】Hindlll和BamHI；Smal；過程②中目的基因和質(zhì)粒形成相同的粘性末端；自身環(huán)化；復(fù)制原點、終止子、標(biāo)記基因；增加農(nóng)桿菌細(xì)胞壁的通透性；T-DNA；抗生素；與棉花細(xì)胞內(nèi)的GhMnaA2轉(zhuǎn)錄的mRNA互補配對；β-甘露糖苷酶
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：22引用：3難度：0.6
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1．下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉栴}：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀?和。
（2）生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴增目的基因時，使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6 -
3．下列有關(guān)基因工程的敘述，正確的是（ ?。?/h2>
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