針對新冠病毒(SARS-CoV-2)的重組蛋白疫苗、核酸疫苗(包括 DNA疫苗和 RNA疫苗)等疫苗都在研發(fā)當(dāng)中。如圖為其中一種疫苗的研發(fā)思路,圖中①~⑦表示過程,虛線箭頭表示 NcoⅠ、SphⅠ、NheI、BamHⅠ的酶切位點(diǎn)(四種酶的識別序列詳見表),標(biāo)記基因 SUC2控制合成蔗糖酶,使 P型酵母菌能利用培養(yǎng)基中的蔗糖生存。
限制酶 | NcoⅠ | SphⅠ | NheⅠ | BamHⅠ |
識別序列和切割位點(diǎn) | C↓CATGG | GCATG↓C | G↓GATCC | G↓CTAGC |
(1)圖中①過程需要使用
逆轉(zhuǎn)錄
逆轉(zhuǎn)錄
酶先得到cDNA,再使用 PCR(聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng))
PCR(聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng))
技術(shù)擴(kuò)增得到S基因。(2)為使③過程順利進(jìn)行,需先使用限制酶
Ncol
Ncol
和 Nhel
Nhel
切割質(zhì)粒B,選用兩種限制酶對新冠病毒的S基因進(jìn)行切割的目的是 防止S基因自身環(huán)化、防止S基因與運(yùn)載體反向連接
防止S基因自身環(huán)化、防止S基因與運(yùn)載體反向連接
(答出1點(diǎn)即可)。(3)圖中表示篩選的過程是
⑤
⑤
(填編號),篩選時應(yīng)使用以 蔗糖
蔗糖
為唯一碳源的培養(yǎng)基。(4)重組疫苗注入志愿者體內(nèi)后,S蛋白基因指導(dǎo)合成的S蛋白作為
抗原
抗原
,刺激機(jī)體產(chǎn)生能與之相結(jié)合的抗體,抗體的分泌量可作為檢測疫苗對志愿者免疫效果的指標(biāo)。參加臨床試驗(yàn)的志愿者需要滿足的條件之一是 無
無
(選填“有”或“無”)SARS-C。V-2感染史,理由是 有SARS-CoV-2感染史的志愿者血清中會存在一定量的相應(yīng)抗體,對試驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生干擾
有SARS-CoV-2感染史的志愿者血清中會存在一定量的相應(yīng)抗體,對試驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生干擾
。【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合.
【答案】逆轉(zhuǎn)錄;PCR(聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng));Ncol;Nhel;防止S基因自身環(huán)化、防止S基因與運(yùn)載體反向連接;⑤;蔗糖;抗原;無;有SARS-CoV-2感染史的志愿者血清中會存在一定量的相應(yīng)抗體,對試驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生干擾
【解答】
【點(diǎn)評】
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