奶牛乳腺炎是奶牛養(yǎng)殖業(yè)中最常見(jiàn)且對(duì)奶牛危害最嚴(yán)重的一種復(fù)雜乳腺綜合疾病，會(huì)導(dǎo)致奶牛出現(xiàn)妊娠率降低、流產(chǎn)率升高等，影響奶牛的繁殖性能?，F(xiàn)欲對(duì)導(dǎo)致奶牛乳腺炎的病原體進(jìn)行分離鑒定?；卮鹣铝袉?wèn)題：
（1）乳樣采集：采樣前對(duì)奶牛乳區(qū)進(jìn)行

清洗、消毒

清洗、消毒

，隨后采集多乳區(qū)混合生鮮乳樣品于無(wú)菌離心管中，置冰盒暫存，用于細(xì)菌分離培養(yǎng)。
（2）細(xì)菌分離培養(yǎng)及鑒定：將乳樣搖勻后進(jìn)行

梯度稀釋

梯度稀釋

，取一定體積不同濃度乳樣接種于平板上，使用涂布器涂抹均勻涂布器的滅菌操作是

沾取酒精后在酒精燈火焰上進(jìn)行灼燒滅菌

沾取酒精后在酒精燈火焰上進(jìn)行灼燒滅菌

。接種后的平板于恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)一定時(shí)間，肉眼觀察菌落的

生長(zhǎng)狀態(tài)和（菌落的）顏色、形狀和大小

生長(zhǎng)狀態(tài)和（菌落的）顏色、形狀和大小

，挑取典型的菌落進(jìn)行劃線純化，并對(duì)典型單個(gè)菌落進(jìn)行染色，在油鏡下進(jìn)行鏡檢，初步判定細(xì)菌類(lèi)屬。
（3）病原菌藥敏實(shí)驗(yàn)：鑒定發(fā)現(xiàn)，導(dǎo)致奶牛乳腺炎的主要病原微生物為乳房鏈球菌。抑菌物質(zhì)抑制受試菌生長(zhǎng)的最低濃度，即最小抑菌濃度（MIC）?，F(xiàn)要進(jìn)行乳房鏈球菌藥敏實(shí)驗(yàn)，將含有定量抗菌藥物的紙片貼在已接種

乳房鏈球菌

乳房鏈球菌

的瓊脂平板上。紙片中所含藥物溶解后不斷向紙片周?chē)鷧^(qū)域擴(kuò)散形成遞減的梯度濃度，平板上會(huì)出現(xiàn)抑菌圈。抑菌圈的大小反映

乳房鏈球菌對(duì)測(cè)定藥物的敏感程度

乳房鏈球菌對(duì)測(cè)定藥物的敏感程度

，其形成原因是

在紙片周?chē)志鷦舛确秶鷥?nèi)乳房鏈球菌的生長(zhǎng)被抑制，從而形成透明的抑菌圈

在紙片周?chē)志鷦舛确秶鷥?nèi)乳房鏈球菌的生長(zhǎng)被抑制，從而形成透明的抑菌圈

，并與該藥對(duì)受試菌的（MIC）呈

負(fù)相關(guān)

負(fù)相關(guān)

（填“正相關(guān)”或“負(fù)相關(guān)”）。