如圖為培育轉基因抗蟲棉的技術路線示意圖。
回答下列問題：
（1）通常用 相同相同的限制酶切含抗蟲基因的DNA和Ti質粒，影響酶切作用時間的因素除了含目的基因的DNA片段和載體等酶切對象的濃度外，還有 酶濃度、溫度酶濃度、溫度。（答2點即可）
（2）Ti質粒的 T-DNAT-DNA區(qū)域有生長素基因和細胞分裂素基因，農(nóng)桿菌感染植物細胞后，這兩種基因進入植物細胞并表達，從而打破植物細胞的 基因表達基因表達平衡，干擾植物細胞的正常分裂、生長，不能再分化成植株。因此在構建重組質粒前需將這兩種基因從克隆載體中 敲除敲除。
（3）在農(nóng)桿菌與植物細胞共培養(yǎng)完成 轉化轉化后，需先在 BB（A．含抗生素B．不含抗生素C．是否含抗生素無要求）的液體全營養(yǎng)培養(yǎng)基中振蕩培養(yǎng)一段時間，使農(nóng)桿菌恢復到正常的生理狀態(tài)。并表達 抗蟲基因抗蟲基因，再轉入篩選培養(yǎng)基中進行選擇培養(yǎng)，其中確定選擇培養(yǎng)基中所用的抗生素種類時，必須要考慮的因素有 農(nóng)桿菌所攜帶的抗生素抗性基因，抗生素濃度農(nóng)桿菌所攜帶的抗生素抗性基因，抗生素濃度。（答2點即可）
（4）棉花葉肉細胞的全能性表達能力 小于小于胚組織，但培育轉基因抗蟲棉時，選擇棉花葉肉細胞作為受體細胞，是為了將抗蟲基因定點整合進 葉綠體葉綠體基因組中，以克服細胞核轉化中經(jīng)常出現(xiàn)的外源基因表達效率低，以及避免造成核基因隨花粉擴散而帶來轉基因植物的 基因污染基因污染問題。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】相同；酶濃度、溫度；T-DNA；基因表達；敲除；轉化；B；抗蟲基因；農(nóng)桿菌所攜帶的抗生素抗性基因，抗生素濃度；小于；葉綠體；基因污染
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/5/10 8:0:9組卷：7引用：2難度：0.5
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1．下列有關基因工程技術和蛋白質工程技術敘述正確的是（ ）
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．下列有關基因工程的敘述，正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7 -
3．幾丁質是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質酶可催化幾丁質水解。通過基因工程將幾丁質酶基因轉入植物體內(nèi)，可增強其抗真菌病的能力。回答下列問題：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得。基因文庫包括和。
（2）生物體細胞內(nèi)的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質酶基因和質粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉基因植株（幾丁質酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6