白葉枯病是造成我國(guó)重要糧食作物--水稻嚴(yán)重減產(chǎn)的重要原因之一。某科研團(tuán)隊(duì)將白葉枯病抗性基因Xa₂₁與質(zhì)粒重組（圖1），利用人工破損處理的水稻幼苗細(xì)胞借助根癌農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法獲得抗白葉枯病的水稻品種，其中根癌農(nóng)桿菌侵染植物細(xì)胞過(guò)程如圖2所示，已知不同種限制酶識(shí)別序列不同。請(qǐng)回答：

（1）構(gòu)建圖1基因表達(dá)載體時(shí)，最佳方案是使用

BamHⅠ、HindⅢ

BamHⅠ、HindⅢ

分別處理含 Xa₂₁基因的DNA片段和Ti質(zhì)粒，該方案不僅可以避免處理后的白葉枯病抗性基因Xa₂₁和Ti質(zhì)粒發(fā)生

自身環(huán)化和反向鏈接

自身環(huán)化和反向鏈接

也能確保Xa₂₁基因定點(diǎn)插入Ti質(zhì)粒的

T-DNA片段

T-DNA片段

。
（2）基因表達(dá)載體上M抗生素抗性基因的作用是

有利于重組Ti質(zhì)粒的篩選

有利于重組Ti質(zhì)粒的篩選

，Ti質(zhì)粒中除圖中包含的構(gòu)件外還應(yīng)必備的構(gòu)件有

復(fù)制原點(diǎn)、啟動(dòng)子、終止子

復(fù)制原點(diǎn)、啟動(dòng)子、終止子

。
（3）由圖2可知，水稻幼苗細(xì)胞受損后會(huì)產(chǎn)生某些信號(hào)分子，用于吸引農(nóng)桿菌移向受損水稻，這些信號(hào)分子可能是

酚類(lèi)化合物

酚類(lèi)化合物

，信號(hào)傳導(dǎo)到根癌農(nóng)桿菌細(xì)胞內(nèi)激活了Ti質(zhì)粒上的Vir區(qū)中的多個(gè)基因表達(dá)，其表達(dá)的蛋白質(zhì)的功能有

組裝形成通道復(fù)合體、催化產(chǎn)生單鏈T-DNA片段、與單鏈T-DNA片段結(jié)合形成成熟T復(fù)合體

組裝形成通道復(fù)合體、催化產(chǎn)生單鏈T-DNA片段、與單鏈T-DNA片段結(jié)合形成成熟T復(fù)合體

（至少寫(xiě)兩個(gè)）。農(nóng)桿菌細(xì)胞內(nèi)形成的成熟T復(fù)合體借助細(xì)胞膜上的通道復(fù)合體定向進(jìn)入水稻幼苗細(xì)胞，最終目標(biāo)是

將含有Xa_2l基因的T-DNA整合到水稻細(xì)胞染色體DNA上

將含有Xa_2l基因的T-DNA整合到水稻細(xì)胞染色體DNA上

。
（4）將含白葉枯病抗性基因Xa₂₁的水稻幼苗細(xì)胞經(jīng)過(guò)

植物組織培養(yǎng)

植物組織培養(yǎng)

技術(shù)可發(fā)育成幼苗。經(jīng)檢測(cè)，科研人員發(fā)現(xiàn)部分獲得Xa₂₁基因的水稻幼苗不具有抗白葉枯病的能力，原因可能是

Xa_2l基因轉(zhuǎn)錄或翻譯異常

Xa_2l基因轉(zhuǎn)錄或翻譯異常

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