重組PCR技術是一項新的PCR技術,通過重組PCR技術能將兩個不同的DNA連接成為一個新DNA分子。某科研小組從豬源大腸桿菌中擴增得到LTB和ST1兩個基因片段,利用重組PCR技術構建了LTB-ST1融合基因,制備過程如圖所示?;卮鹣铝袉栴}:
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(1)利用PCR技術擴增目的基因的過程中,向反應體系中加入的物質除了引物和模板鏈外,還需要加入 耐高溫的DNA聚合酶和4種脫氧核苷酸耐高溫的DNA聚合酶和4種脫氧核苷酸。利用PCR技術擴增目的基因,依據的生物學原理是 DNA雙鏈復制DNA雙鏈復制。
(2)從P2、P3兩種引物的角度分析,LTB和ST1基因能夠融合的關鍵是。PCR1和PCR2不能在同一個反應體系中進行,原因是 這兩種引物的部分區(qū)域能進行堿基互補配對;P2和P3能結合,會干擾引物和模板鏈的結合,影響PCR過程這兩種引物的部分區(qū)域能進行堿基互補配對;P2和P3能結合,會干擾引物和模板鏈的結合,影響PCR過程。②過程 不需要不需要(填“需要”或“不需要”)加入引物,原因是 兩條母鏈可作為合成子鏈的引物兩條母鏈可作為合成子鏈的引物。
(3)科研小組為了檢測是否成功構建出融合基因,將反應后體系中的各種M表示標準對照基因DNA分子進行電泳,結果如圖所示。則融合基因最可能是 33,1、2、3表示不同DNA電泳結果判斷依據是 不同DNA分子的相對分子質量大小不同,在電場中遷移率不同不同DNA分子的相對分子質量大小不同,在電場中遷移率不同。
【考點】DNA片段的擴增與電泳鑒定.
【答案】耐高溫的DNA聚合酶和4種脫氧核苷酸;DNA雙鏈復制;這兩種引物的部分區(qū)域能進行堿基互補配對;P2和P3能結合,會干擾引物和模板鏈的結合,影響PCR過程;不需要;兩條母鏈可作為合成子鏈的引物;3;不同DNA分子的相對分子質量大小不同,在電場中遷移率不同
【解答】
【點評】
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發(fā)布:2024/5/6 8:0:9組卷:92難度:0.6
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