蔗糖是植物光合作用中最先形成的游離糖，蔗糖轉(zhuǎn)運蛋白在蔗糖的跨膜轉(zhuǎn)運等過程中起重要作用。目前，在擬南芥中已經(jīng)鑒定出9個蔗糖轉(zhuǎn)運蛋白基因。以AtSUC3、AtSUC5純合單突變體為親本，采用傳統(tǒng)雜交法并結(jié)合PCR技術(shù)獲得AtSUC3和AtSUC5純合雙突體。
（1）科研人員構(gòu)建含已知序列T-DNA片段的

重組DNA分子（重組質(zhì)粒、重組載體）

重組DNA分子（重組質(zhì)粒、重組載體）

，轉(zhuǎn)化野生型擬南芥，導(dǎo)致被插入基因發(fā)生

基因突變

基因突變

，篩選和自交得到了2種純合突體AtSUC3和AtSUC5。
（2）為研究AtSUC3和AtSUC5基因的傳遞規(guī)律，上述2種純合突變體雜交得F₁，F(xiàn)₁自交獲得F₂．依據(jù)AtSUC3、AtSUC5、T-DNA片段（完整的T-DNA過大，不能完成PCR）序列設(shè)計引物分別為Ⅰ～Ⅶ（如圖所示）。

①PCR1利用引物

Ⅰ、Ⅳ

Ⅰ、Ⅳ

（填寫引物代號）可克隆AtSUC5，標記為A；PCR2利用引物

Ⅰ、Ⅴ

Ⅰ、Ⅴ

（填寫引物代號）可克隆被T-DNA插入的AtSUC5，標記為a；PCR3克隆AtSUC3，標記為B；PCR4克隆被T-DNA插入的AtSUC3，標記為b。
②部分F₂植株的PCR情況見表

基因型	i	ii	iii	iv	v
PCR1	+	-	+	？	…
PCR2	+	+	-	？	…
PCR3	+	+	-	？	…
PCR4	+	-	+	？	…
“+”有PCR產(chǎn)物“-”無PCR產(chǎn)物

表中i植株的基因型為

AaBb

AaBb

（用A、a、B、b表示）。若表中iv植株為AtSUC3/AtSUC5雙突變純合子，其對應(yīng)的PCR1～PCR4結(jié)果依次為

-+-+

-+-+

（用“+”或“-”表示）。若AtSUC3/AtSUC5雙突變純合子在F₂所占比例為n²（n²遠遠小于

1

16

），則親本型配子的比例為

1-2n

1-2n

，說明AtSUC3與AtSUC5的位置關(guān)系為

位于（一對）同源染色體上

位于（一對）同源染色體上

。
（3）擬南芥的果實為角果，成熟后可自然開裂傳播種子。進一步研究發(fā)現(xiàn)，AtSUC3純合突變體的角果開裂率較野生型明顯降低，AtSUC3/AtSUC5雙突變純合子角果開裂率介于兩者之間，說明AtSUC3、AtSUC5基因功能關(guān)系為

拮抗

拮抗

（選擇填寫“協(xié)同”或“拮抗”），共同控制擬南芥種子的傳播。