VNN1基因（1542bp）與炎癥相關性疾病有關，GFP基因（4735bp）控制綠色熒光蛋白的合成，該蛋白可在相應波長的紫外光激發(fā)下發(fā)出綠色熒光。某研究小組進行鼠源GFP-VNN1重組質(zhì)粒的構(gòu)建及其功能研究，回答下列問題：
（1）為構(gòu)建重組質(zhì)粒，研究小組從數(shù)據(jù)庫查找到VNNl的DNA序列，并設計引物。上游引物：5'-AAGCTTCCGCTGCACCATGACTACTC-3'（下劃線為HindⅢ酶切位點），下游引物：5'-GGATCCGCTCGAGCTACCAACTTAATGA-3'（下劃線為BamH I酶切位點），之后進行PCR擴增，PCR的原理是 DNA雙鏈復制DNA雙鏈復制。擴增后的VNN1基因要與含GFP基因的載體連接，需用 HindⅢ酶和BamHⅠ酶HindⅢ酶和BamHⅠ酶（填具體酶）切割VNN1基因和含GFP基因的載體，再用 DNA連接酶DNA連接酶 酶處理，構(gòu)建重組質(zhì)粒。
（2）GFP基因在重組質(zhì)粒中可作為 標記基因標記基因，其作用是 鑒別受體細胞中是否含有目的基因，從而將含目的基因的細胞篩選出來鑒別受體細胞中是否含有目的基因，從而將含目的基因的細胞篩選出來。用之前相同的限制酶對GFP-VNN1重組質(zhì)粒切割后，進行電泳鑒定時得到如圖1所示的部分條帶，結(jié)果表明 VNN1基因已經(jīng)插入到含GFP基因的載體中VNN1基因已經(jīng)插入到含GFP基因的載體中。
（3）IL-6為體內(nèi)重要的炎癥因子，能與相應的受體結(jié)合，激活炎癥反應。圖2為GFP-VNN1重組質(zhì)粒對細胞分泌IL-6的影響，由此說明 VNN1基因表達產(chǎn)物能促進細胞分泌炎癥因子IL-6VNN1基因表達產(chǎn)物能促進細胞分泌炎癥因子IL-6，同時發(fā)現(xiàn)與正常組比較，空質(zhì)粒轉(zhuǎn)染組IL-6的表達有輕微升高，造成這種現(xiàn)象的可能原因是 操作過程中對細胞的損傷（或用到化學試劑對細胞具有一定的毒性作用），可以激活相應細胞分泌炎癥因子IL-6操作過程中對細胞的損傷（或用到化學試劑對細胞具有一定的毒性作用），可以激活相應細胞分泌炎癥因子IL-6。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】DNA雙鏈復制；HindⅢ酶和BamHⅠ酶；DNA連接酶；標記基因；鑒別受體細胞中是否含有目的基因，從而將含目的基因的細胞篩選出來；VNN1基因已經(jīng)插入到含GFP基因的載體中；VNN1基因表達產(chǎn)物能促進細胞分泌炎癥因子IL-6；操作過程中對細胞的損傷（或用到化學試劑對細胞具有一定的毒性作用），可以激活相應細胞分泌炎癥因子IL-6
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：17引用：2難度：0.7
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1．下列有關基因工程技術和蛋白質(zhì)工程技術敘述正確的是（ ）
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3．幾丁質(zhì)是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強其抗真菌病的能力。回答下列問題：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀?和。
（2）生物體細胞內(nèi)的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6
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