將微生物接種在只缺少某種營養(yǎng)物質(zhì)的基礎(chǔ)培養(yǎng)基中,再將所缺的營養(yǎng)物質(zhì)點(diǎn)植于平板上,該營養(yǎng)物質(zhì)便逐漸擴(kuò)散于植點(diǎn)周圍。該微生物若需要此種營養(yǎng)物質(zhì),便在這種營養(yǎng)物質(zhì)擴(kuò)散處生長繁殖,形成肉眼可見的菌落圈,這種測定微生物營養(yǎng)需求的方法稱為生長譜法。某興趣小組嘗試用生長譜法測定某種大腸桿菌對糖類(碳源)的需求情況,操作流程如下:
Ⅰ.培養(yǎng)基的制備。該小組所用無碳培養(yǎng)基配方如表(加水定容至1L):
成分 | NaCl | KH2PO4 | K2HPO4 | (HN4)2SO4 | MgSO4?7H2O | 瓊脂 |
質(zhì)量/g | 1 | 0.5 | 0.5 | 2 | 0.2 | 20 |
Ⅱ.將大腸桿菌懸液與溶化并冷卻至50℃的固體培養(yǎng)基混勻,倒平板。
Ⅲ.將已凝固的平板背面用記號筆劃分為四個區(qū),并注明要點(diǎn)植的糖類名稱。
V.通過無菌操作分別加入蘸有不同糖類的無菌濾紙片,待平板吸收干燥后倒置培養(yǎng)24小時。
結(jié)合所學(xué)知識,回答下列問題:
(1)無碳培養(yǎng)基配方中加入(NH4)2SO4的目的是
提供氮源
提供氮源
。對培養(yǎng)基及糖溶液通常采用的滅菌方法是高壓蒸汽滅菌法
高壓蒸汽滅菌法
。倒平板后用稀釋涂布平板
稀釋涂布平板
法進(jìn)行接種。(2)該小組發(fā)現(xiàn)最終在培養(yǎng)基的四個區(qū)內(nèi)均有菌落圈產(chǎn)生,但大小不同,據(jù)此得到的初步結(jié)論是
大腸桿菌可以利用四種糖類(葡萄糖、麥芽糖、蔗糖、乳糖)作為碳源,但利用的程度不同
大腸桿菌可以利用四種糖類(葡萄糖、麥芽糖、蔗糖、乳糖)作為碳源,但利用的程度不同
。(3)生長譜法還可用于某些營養(yǎng)缺陷型菌株(失去合成某種生長因子能力的菌株)的篩選和鑒定,例如大腸桿菌經(jīng)紫外線誘變處理后會產(chǎn)生一些營養(yǎng)缺陷型突變個體,現(xiàn)已純化并制備出某營養(yǎng)缺陷型的菌懸液,但不清楚是氨基酸缺陷型、維生素缺陷型還是氨基酸-維生素缺陷型,請簡要寫出用生長譜法進(jìn)行鑒定的思路,并預(yù)期可能的結(jié)果及結(jié)論
將菌懸液與溶化并冷卻至50℃的不含氨基酸和維生素的基礎(chǔ)培養(yǎng)基混勻,倒平板;將培養(yǎng)基劃分成兩個相等的區(qū)域A、B;A區(qū)點(diǎn)植氨基酸、B區(qū)點(diǎn)植維生素;在適宜溫度下培養(yǎng),觀察菌落產(chǎn)生的區(qū)域。若菌落只在A區(qū)產(chǎn)生,則為氨基酸缺陷型;若菌落只在B區(qū)產(chǎn)生,則為維生素缺陷型;若菌落產(chǎn)生在AB交界處,則為氨基酸-維生素缺陷型
將菌懸液與溶化并冷卻至50℃的不含氨基酸和維生素的基礎(chǔ)培養(yǎng)基混勻,倒平板;將培養(yǎng)基劃分成兩個相等的區(qū)域A、B;A區(qū)點(diǎn)植氨基酸、B區(qū)點(diǎn)植維生素;在適宜溫度下培養(yǎng),觀察菌落產(chǎn)生的區(qū)域。若菌落只在A區(qū)產(chǎn)生,則為氨基酸缺陷型;若菌落只在B區(qū)產(chǎn)生,則為維生素缺陷型;若菌落產(chǎn)生在AB交界處,則為氨基酸-維生素缺陷型
。【考點(diǎn)】微生物的選擇培養(yǎng)(稀釋涂布平板法);微生物的選擇培養(yǎng)和計數(shù).
【答案】提供氮源;高壓蒸汽滅菌法;稀釋涂布平板;大腸桿菌可以利用四種糖類(葡萄糖、麥芽糖、蔗糖、乳糖)作為碳源,但利用的程度不同;將菌懸液與溶化并冷卻至50℃的不含氨基酸和維生素的基礎(chǔ)培養(yǎng)基混勻,倒平板;將培養(yǎng)基劃分成兩個相等的區(qū)域A、B;A區(qū)點(diǎn)植氨基酸、B區(qū)點(diǎn)植維生素;在適宜溫度下培養(yǎng),觀察菌落產(chǎn)生的區(qū)域。若菌落只在A區(qū)產(chǎn)生,則為氨基酸缺陷型;若菌落只在B區(qū)產(chǎn)生,則為維生素缺陷型;若菌落產(chǎn)生在AB交界處,則為氨基酸-維生素缺陷型
【解答】
【點(diǎn)評】
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發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:8引用:1難度:0.7
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阿拉伯膠是一種多糖,研究者從某地合歡樹下距離地表深10~15cm處的土樣中初篩到能合成阿拉伯膠降解酶的菌株SM01,以下為該菌株的鑒定過程.
(1)為獲得單菌落,可采用平板劃線法或
A.細(xì)胞膜 B.核糖體 C.?dāng)M核 D.莢膜
(2)表中培養(yǎng)液pH均為6.0,若對SM01中阿拉伯膠降解酶的活力進(jìn)行測定,則應(yīng)選用表中的
①缺少
②具有
③缺乏
表 試驗(yàn)用培養(yǎng)液配方培養(yǎng)液 阿拉伯膠 阿拉伯膠酶 NaNO3 牛肉膏 K2SOPO4 MgSO4?7H2O KCl FeSO4?7H2O
A
25g/L__ __ __
g/L
g/L
g/Lg/L B
25g/L
g/L__
g/L
g/L
g/L
g/L
g/LC __ __
g/L__
g/L
g/L
g/L
g/LD
25g/L__
g/L__
g/L
g/L
g/L
g/L發(fā)布:2025/1/2 8:0:1組卷:6引用:1難度:0.5 -
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發(fā)布:2024/12/31 4:0:1組卷:17引用:3難度:0.7 -
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