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將微生物接種在只缺少某種營養(yǎng)物質(zhì)的基礎(chǔ)培養(yǎng)基中,再將所缺的營養(yǎng)物質(zhì)點(diǎn)植于平板上,該營養(yǎng)物質(zhì)便逐漸擴(kuò)散于植點(diǎn)周圍。該微生物若需要此種營養(yǎng)物質(zhì),便在這種營養(yǎng)物質(zhì)擴(kuò)散處生長繁殖,形成肉眼可見的菌落圈,這種測定微生物營養(yǎng)需求的方法稱為生長譜法。某興趣小組嘗試用生長譜法測定某種大腸桿菌對糖類(碳源)的需求情況,操作流程如下:
Ⅰ.培養(yǎng)基的制備。該小組所用無碳培養(yǎng)基配方如表(加水定容至1L):
成分 NaCl KH2PO4 K2HPO4 (HN42SO4 MgSO4?7H2O 瓊脂
質(zhì)量/g 1 0.5 0.5 2 0.2 20
同時配制質(zhì)量分?jǐn)?shù)為10%的葡萄糖、麥芽糖、蔗糖、乳糖溶液各50mL
Ⅱ.將大腸桿菌懸液與溶化并冷卻至50℃的固體培養(yǎng)基混勻,倒平板。
Ⅲ.將已凝固的平板背面用記號筆劃分為四個區(qū),并注明要點(diǎn)植的糖類名稱。
V.通過無菌操作分別加入蘸有不同糖類的無菌濾紙片,待平板吸收干燥后倒置培養(yǎng)24小時。
結(jié)合所學(xué)知識,回答下列問題:
(1)無碳培養(yǎng)基配方中加入(NH42SO4的目的是
提供氮源
提供氮源
。對培養(yǎng)基及糖溶液通常采用的滅菌方法是
高壓蒸汽滅菌法
高壓蒸汽滅菌法
。倒平板后用
稀釋涂布平板
稀釋涂布平板
法進(jìn)行接種。
(2)該小組發(fā)現(xiàn)最終在培養(yǎng)基的四個區(qū)內(nèi)均有菌落圈產(chǎn)生,但大小不同,據(jù)此得到的初步結(jié)論是
大腸桿菌可以利用四種糖類(葡萄糖、麥芽糖、蔗糖、乳糖)作為碳源,但利用的程度不同
大腸桿菌可以利用四種糖類(葡萄糖、麥芽糖、蔗糖、乳糖)作為碳源,但利用的程度不同
。
(3)生長譜法還可用于某些營養(yǎng)缺陷型菌株(失去合成某種生長因子能力的菌株)的篩選和鑒定,例如大腸桿菌經(jīng)紫外線誘變處理后會產(chǎn)生一些營養(yǎng)缺陷型突變個體,現(xiàn)已純化并制備出某營養(yǎng)缺陷型的菌懸液,但不清楚是氨基酸缺陷型、維生素缺陷型還是氨基酸-維生素缺陷型,請簡要寫出用生長譜法進(jìn)行鑒定的思路,并預(yù)期可能的結(jié)果及結(jié)論
將菌懸液與溶化并冷卻至50℃的不含氨基酸和維生素的基礎(chǔ)培養(yǎng)基混勻,倒平板;將培養(yǎng)基劃分成兩個相等的區(qū)域A、B;A區(qū)點(diǎn)植氨基酸、B區(qū)點(diǎn)植維生素;在適宜溫度下培養(yǎng),觀察菌落產(chǎn)生的區(qū)域。若菌落只在A區(qū)產(chǎn)生,則為氨基酸缺陷型;若菌落只在B區(qū)產(chǎn)生,則為維生素缺陷型;若菌落產(chǎn)生在AB交界處,則為氨基酸-維生素缺陷型
將菌懸液與溶化并冷卻至50℃的不含氨基酸和維生素的基礎(chǔ)培養(yǎng)基混勻,倒平板;將培養(yǎng)基劃分成兩個相等的區(qū)域A、B;A區(qū)點(diǎn)植氨基酸、B區(qū)點(diǎn)植維生素;在適宜溫度下培養(yǎng),觀察菌落產(chǎn)生的區(qū)域。若菌落只在A區(qū)產(chǎn)生,則為氨基酸缺陷型;若菌落只在B區(qū)產(chǎn)生,則為維生素缺陷型;若菌落產(chǎn)生在AB交界處,則為氨基酸-維生素缺陷型
。

【答案】提供氮源;高壓蒸汽滅菌法;稀釋涂布平板;大腸桿菌可以利用四種糖類(葡萄糖、麥芽糖、蔗糖、乳糖)作為碳源,但利用的程度不同;將菌懸液與溶化并冷卻至50℃的不含氨基酸和維生素的基礎(chǔ)培養(yǎng)基混勻,倒平板;將培養(yǎng)基劃分成兩個相等的區(qū)域A、B;A區(qū)點(diǎn)植氨基酸、B區(qū)點(diǎn)植維生素;在適宜溫度下培養(yǎng),觀察菌落產(chǎn)生的區(qū)域。若菌落只在A區(qū)產(chǎn)生,則為氨基酸缺陷型;若菌落只在B區(qū)產(chǎn)生,則為維生素缺陷型;若菌落產(chǎn)生在AB交界處,則為氨基酸-維生素缺陷型
【解答】
【點(diǎn)評】
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發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:8引用:1難度:0.7
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  • 1.回答下列關(guān)于微生物的問題.
    阿拉伯膠是一種多糖,研究者從某地合歡樹下距離地表深10~15cm處的土樣中初篩到能合成阿拉伯膠降解酶的菌株SM01,以下為該菌株的鑒定過程.
    (1)為獲得單菌落,可采用平板劃線法或
     
    法將初篩菌液接種在
     
    培養(yǎng)基上.46SM01菌落為粉白色,初期呈突起絮狀,在顯微鏡下觀察到,菌絲白色致密,且有分生孢子,細(xì)胞核直徑約1μm,初步推測為真菌,則其特征中,最能說明SM01是真菌的是有細(xì)胞核,且有分生孢子.SM01還一定具有的結(jié)構(gòu)有(多選)
     

    A.細(xì)胞膜    B.核糖體    C.?dāng)M核    D.莢膜
    (2)表中培養(yǎng)液pH均為6.0,若對SM01中阿拉伯膠降解酶的活力進(jìn)行測定,則應(yīng)選用表中的
     
    培養(yǎng)液,針對不選用的其他培養(yǎng)液,分別說明原因:
    ①缺少
     
    ,SM01不能很好生長
    ②具有
     
    ,會影響對SM01自身產(chǎn)生的酶活力的測定結(jié)果
    ③缺乏
     
    ,會影響SM01的生長,也無法對阿拉伯膠酶活力進(jìn)行測定.
    表 試驗(yàn)用培養(yǎng)液配方
     培養(yǎng)液 阿拉伯膠  阿拉伯膠酶   NaNO3  牛肉膏  K2SOPO4  MgSO4?7H2O KCl FeSO4?7H2O
     
     A
     25g/L
     __  __  __
     g/L

     g/L

     g/L
     g/L
     B
     25g/L

     g/L
     __
     g/L

     g/L

     g/L

     g/L

     g/L
     C  __  __
     g/L
     __
     g/L

     g/L

     g/L

     g/L
     D
     25g/L
     __
     g/L
     __
     g/L

     g/L

     g/L

     g/L

    發(fā)布:2025/1/2 8:0:1組卷:6引用:1難度:0.5
  • 2.丙草胺(C15H22ClNO2)是一種廣泛應(yīng)用的除草劑,能抑制土壤細(xì)菌、放線菌和真菌的生長。某研究小組從某地土壤中分離獲得能有效降解丙草胺的細(xì)菌菌株,并對其計數(shù)(如圖所示),以期為修復(fù)污染土壤提供微生物資源。下列敘述錯誤的是( ?。?br />菁優(yōu)網(wǎng)

    發(fā)布:2024/12/31 4:0:1組卷:17引用:3難度:0.7
  • 3.為了防治大氣污染,煙氣脫硫是環(huán)保領(lǐng)域迫切需要解決的問題.研究人員為了獲得用于煙氣脫硫的脫硫細(xì)菌,并了解其生長規(guī)律,進(jìn)行了如下操作.請回答下列問題:
    (1)采樣與細(xì)菌的篩選:在某熱電廠煙囪周圍區(qū)域要盡量做到
     
    采集土樣.為確保能夠從樣品中分離到所需要的煙氣脫硫細(xì)菌,可以通過
     
    增加脫硫菌的濃度.
    (2)馴化脫硫細(xì)菌:將篩選出的脫硫細(xì)菌接種于有少量無菌水的三角瓶中,邊攪拌邊持續(xù)通入SO2氣體幾分鐘,然后接種到培養(yǎng)基上,待長出菌落后再重復(fù)上述步驟,并逐步延長通SO2的時間,同時逐步降低培養(yǎng)基的pH.此操作的目的是分離出
     
    的脫硫細(xì)菌.
    (3)培養(yǎng)與觀察:一般來說,在一定的培養(yǎng)條件下(相同的培養(yǎng)基、溫度及培養(yǎng)時間),馴化后的脫硫細(xì)菌表現(xiàn)出穩(wěn)定的
     
    特征.用高倍顯微鏡
     
    (填“可以”或“不可以”)觀察到脫硫細(xì)菌的核糖體.
    (4)探究生長規(guī)律:在計數(shù)時,計數(shù)方法有稀釋涂布平板法和
     
    直接計數(shù)法.在用稀釋涂布平板法進(jìn)行計數(shù)時,當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時,培養(yǎng)基表面生長的一個菌落來源于樣品稀釋液中的
     
    ;通過統(tǒng)計平板上的菌落數(shù),就能推測出樣品中大約含有多少活菌,通常推測統(tǒng)計的菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目
     

    發(fā)布:2025/1/1 8:0:2組卷:6引用:2難度:0.5
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