某科研人員從蘇云金芽孢桿菌中獲取BT毒蛋白基因,并將其導(dǎo)入大豆葉肉細(xì)胞,培育出抗蟲的轉(zhuǎn)基因大豆,主要過程如下?;卮鹣铝袉栴}:
(1)質(zhì)粒上存在潮霉素抗性基因的目的是 檢測目的基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞,從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來檢測目的基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞,從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來。
(2)過程①表示利用PCR獲取BT毒蛋白基因,其前提是 根據(jù)BT毒蛋白基因兩端的核苷酸序列合成引物根據(jù)BT毒蛋白基因兩端的核苷酸序列合成引物;在BT毒蛋白基因兩側(cè)分別添加HindⅢ和BamHI限制酶序列,其目的是 讓BT毒蛋白基因與質(zhì)粒定向連接讓BT毒蛋白基因與質(zhì)粒定向連接。
(3)過程①中BT毒蛋白基因連續(xù)擴增5次,形成 3232個BT毒蛋白基因片段,需要 6262個引物。
(4)過程②構(gòu)建重組質(zhì)粒時,將BT毒蛋白基因插入啟動子和終止子之間的原因是 保證BT毒蛋白基因能夠在大豆細(xì)胞中表達(dá)保證BT毒蛋白基因能夠在大豆細(xì)胞中表達(dá)。
(5)將重組質(zhì)粒導(dǎo)入農(nóng)桿菌時,需要用 Ca2+Ca2+處理農(nóng)桿菌,使其處于一種能吸收周圍環(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài)。過程③篩選具有抗蟲能力的大豆,從分子水平上檢測BT毒蛋白基因是否表達(dá)的方法是 抗原—抗體雜交抗原—抗體雜交。
【考點】基因工程的操作過程綜合.
【答案】檢測目的基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞,從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來;根據(jù)BT毒蛋白基因兩端的核苷酸序列合成引物;讓BT毒蛋白基因與質(zhì)粒定向連接;32;62;保證BT毒蛋白基因能夠在大豆細(xì)胞中表達(dá);Ca2+;抗原—抗體雜交
【解答】
【點評】
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