通過咽拭子取樣進(jìn)行 RT-PCR 技術(shù)檢測是目前臨床上診斷新型冠狀病毒感染疑似患者的常用方法，用于核酸檢測的 RT-PCR 試劑盒的部分工作原理簡圖如圖?；卮鹣铝袉栴}：

（1）RT-PCR 是指以病毒的 RNA 為模板通過

逆轉(zhuǎn)錄

逆轉(zhuǎn)錄

過程合成 cDNA，并對 cDNA 進(jìn)行 PCR 擴(kuò)增的過程。PCR  擴(kuò)增時，退火溫度的設(shè)定是成敗的關(guān)鍵。退火溫度過高會破壞

引物

引物

與

模板

模板

的堿基配對。退火溫度的設(shè)定與引物長度、堿基組成有關(guān)，長度相同但

G-C

G-C

含量高的引物需要設(shè)定更高的退火溫度。
（2）利用 RT-PCR 試劑盒對新型冠狀病毒進(jìn)行檢測時，除借助上述 RT-PCR 技術(shù)外，還需要有特異性探針，利用該探針對新型冠狀病毒進(jìn)行檢測的原理是

分子雜交

分子雜交

。
（3）除核酸檢測外，研究人員還研發(fā)了基于病毒蛋白的檢測技術(shù)，該項技術(shù)的關(guān)鍵是生產(chǎn)出能與新冠病毒結(jié)合的特異性抗體。生產(chǎn)該種抗體的大致方案如下：
①向小鼠體內(nèi)注射新冠病毒的抗原蛋白；②分離免疫小鼠的 B 淋巴細(xì)胞，并與小鼠的骨髓瘤細(xì)胞融合，多次篩選、檢測，最終獲得所需雜交瘤細(xì)胞；③將獲得的雜交瘤細(xì)胞在體外條件下做大規(guī)模培養(yǎng)，獲得大量的特異性抗體。
上述生產(chǎn)抗體的方案中使用的技術(shù)手段有

動物細(xì)胞培養(yǎng)、動物細(xì)胞融合

動物細(xì)胞培養(yǎng)、動物細(xì)胞融合

；其中步驟②中經(jīng)多次篩選、檢測后遭淘汰的細(xì)胞有

B細(xì)胞、骨髓瘤細(xì)胞及B-B型、瘤-瘤型融合細(xì)胞

B細(xì)胞、骨髓瘤細(xì)胞及B-B型、瘤-瘤型融合細(xì)胞

； 步驟③大規(guī)模培養(yǎng)時要注意定期更換培養(yǎng)液，其目的是

防止細(xì)胞代謝產(chǎn)物積累對細(xì)胞自身造成危害

防止細(xì)胞代謝產(chǎn)物積累對細(xì)胞自身造成危害

。獲得雜交瘤細(xì)胞后，常用的培養(yǎng)方法除了體外培養(yǎng)，還有

注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖

注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖

。