如圖表示某種綠色熒光蛋白基因表達(dá)載體的構(gòu)建過(guò)程，綠色熒光蛋白基因有820個(gè)堿基對(duì)（bp），質(zhì)粒有5369個(gè)堿基對(duì)（bp）。請(qǐng)據(jù)圖回答問(wèn)題：
（1）上述基因表達(dá)載體的構(gòu)建過(guò)程需要的基本工具包括：限制酶、DNA連接酶、運(yùn)載體限制酶、DNA連接酶、運(yùn)載體。過(guò)程①②用相同的兩種限制酶切割，與單一酶切相比的優(yōu)勢(shì)有 可以避免目的基因自身環(huán)化、使目的基因定向插入到運(yùn)載體中可以避免目的基因自身環(huán)化、使目的基因定向插入到運(yùn)載體中。
（2）過(guò)程②目的基因的擴(kuò)增可通過(guò)PCR技術(shù)實(shí)現(xiàn)，進(jìn)行PCR時(shí)除提供DNA母鏈，4種脫氧核苷酸，還需 Taq酶和人工合成的引物Taq酶和人工合成的引物等基本條件（至少填兩個(gè)）。PCR可成指數(shù)形式擴(kuò)增目的基因，每個(gè)循環(huán)一般可分為 變性、退火、延伸變性、退火、延伸。
（3）已知圖中質(zhì)粒經(jīng)BamHⅠ、HindⅢ雙酶切后進(jìn)行電泳，若出現(xiàn)了一條長(zhǎng)度為5150bp的DNA條帶，則重組質(zhì)粒的長(zhǎng)度為 59705970的DNA片段條帶。
（4）若想獲得發(fā)綠色熒光的小鼠，可將重組質(zhì)粒用 顯微注射顯微注射法導(dǎo)入小鼠的 受精卵受精卵（細(xì)胞）中。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過(guò)程綜合．
【答案】限制酶、DNA連接酶、運(yùn)載體；可以避免目的基因自身環(huán)化、使目的基因定向插入到運(yùn)載體中；Taq酶和人工合成的引物；變性、退火、延伸；5970；顯微注射；受精卵
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布：2024/10/1 1:0:2組卷：9引用：2難度：0.6
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發(fā)布：2024/12/20 5:0:2組卷：35引用：5難度：0.6 -
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（1）獲得轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種過(guò)程中應(yīng)用的生物技術(shù)有（答出2項(xiàng)）等。
（2）為確保目的基因定向插入了質(zhì)粒，應(yīng)該選擇（填酶）切割目的基因和質(zhì)粒。在培養(yǎng)基中加入（填“氨芐青霉素”或“四環(huán)素”）對(duì)目的基因進(jìn)行篩選。
（3）培育轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種的核心工作是圖中過(guò)程（填序號(hào)）。過(guò)程②③采用的方法是。
（4）⑤過(guò)程需要用到等植物激素，在誘導(dǎo)愈傷組織分化成幼苗的過(guò)程中，這兩種植物激素的比例會(huì)發(fā)生變化，原因是。發(fā)布：2024/12/20 2:30:1組卷：16引用：5難度：0.5 -
3．如表為5種限制酶的識(shí)別序列及切割位點(diǎn)，如圖為某種質(zhì)粒和目的基因，箭頭所指為限制酶酶切位點(diǎn)?，F(xiàn)要將圖中的目的基因定向插入到質(zhì)粒中，以制備轉(zhuǎn)基因植株。下列說(shuō)法正確的是（ ）
限制酶 BamHⅠ EcoRⅠ HindⅠ NbeⅠ MunⅠ 識(shí)別序列及切割位點(diǎn) G↓CATCC G↓AATTC A↓AGCTT G↓CTAGC C↓AATTG 
發(fā)布：2024/12/20 3:30:1組卷：6引用：1難度：0.6
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