為實(shí)現(xiàn)對(duì)肝癌的有效治療，研究人員通過(guò)比較肝腫瘤細(xì)胞和正常細(xì)胞間的差異，篩選有效的免疫治療靶點(diǎn)，制備相應(yīng)單克隆抗體并構(gòu)建抗體—藥物偶聯(lián)物。
（1）檢測(cè)發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的CLDN6蛋白能夠促進(jìn)腫瘤發(fā)生，選定其作為單克隆抗體的作用靶點(diǎn)。CLDN6蛋白是一個(gè)跨膜蛋白，包括胞外區(qū)、跨膜區(qū)和胞內(nèi)區(qū)，制備免疫小鼠所用的抗原時(shí)，應(yīng)提取

胞外

胞外

區(qū)基因序列用于設(shè)計(jì)抗原。
（2）將CLDN6蛋白抗原注射到小鼠體內(nèi)，從該小鼠脾臟中獲取

（能產(chǎn)生特定抗體的）B淋巴

（能產(chǎn)生特定抗體的）B淋巴

細(xì)胞，誘導(dǎo)其與骨髓瘤細(xì)胞融合，利用

特定選擇培養(yǎng)基

特定選擇培養(yǎng)基

篩選得到雜交瘤細(xì)胞，經(jīng)克隆化培養(yǎng)和抗體陽(yáng)性檢測(cè)，多次篩選得到產(chǎn)生單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞，最終通過(guò)體內(nèi)或體外培養(yǎng)獲得大量單克隆抗體。
（3）將該單克隆抗體與抗癌藥物DMI 結(jié)合構(gòu)建抗體—藥物偶聯(lián)物（CLDN6-DMI）。用不同濃度的游離DMI、CLDN6-DMI或lgG-DMI（無(wú)關(guān)抗體-DMI）分別處理高表達(dá)CLDN6細(xì)胞和低表達(dá)CLDN6細(xì)胞，檢測(cè)細(xì)胞活力，結(jié)果如圖1：

由圖可知，CLDN6-DMI能特異性殺傷高表達(dá)CLDN6細(xì)胞，依據(jù)是

與低表達(dá)CLDN6細(xì)胞相比，隨CLDN6-DMI處理濃度的升高，高表達(dá)CLDN6細(xì)胞活力下降幅度大

與低表達(dá)CLDN6細(xì)胞相比，隨CLDN6-DMI處理濃度的升高，高表達(dá)CLDN6細(xì)胞活力下降幅度大

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（4）如圖2表示抗體—藥物偶聯(lián)物CLDN6-DMI的作用機(jī)制：由圖分析，CLDN6-DMI能特異性殺傷高表達(dá)CLDN6細(xì)胞的原因是

CLDN6-DMI與高表達(dá)CLDN6細(xì)胞上的CLDN6蛋白特異性結(jié)合的多，進(jìn)入細(xì)胞中，通過(guò)溶酶體裂解，將DMI 釋放出來(lái)發(fā)揮作用

CLDN6-DMI與高表達(dá)CLDN6細(xì)胞上的CLDN6蛋白特異性結(jié)合的多，進(jìn)入細(xì)胞中，通過(guò)溶酶體裂解，將DMI 釋放出來(lái)發(fā)揮作用

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