基因X的表達產(chǎn)物可保護損傷的神經(jīng)細胞?？茖W家構(gòu)建了含X的基因表達載體（圖1），并導入到大鼠神經(jīng)干細胞中，用于干細胞基因治療的研究。請據(jù)此回答下列問題：
（1）構(gòu)建含X的基因表達載體時，應(yīng)選擇圖1中的BamHⅠBamHⅠ限制酶。
（2）酶切后的載體和基因X進行連接，可產(chǎn)生3種連接產(chǎn)物：單個載體自連，基因X與載體正向連接、基因X與載體反向連接（如圖1所示）。為鑒定這3種產(chǎn)物，選擇EcoRI酶和HindHⅢ酶對篩選得到的載體進行雙酶切，并對酶切后的DNA片段進行電泳分析，結(jié)果如圖2所示。圖中1、2、3泳道分別對應(yīng)的載體的連接方式是載體自連載體自連、反向連接反向連接、正向連接正向連接。
（3）在培養(yǎng)大鼠神經(jīng)干細胞的過程中，可使用胰蛋白酶或膠原蛋白胰蛋白酶或膠原蛋白酶將細胞分散開。分散的細胞很快就貼附在瓶壁上，稱為細胞貼壁細胞貼壁。
（4）將正向連接的重組載體導入神經(jīng)干細胞后，為了檢測基因X是否轉(zhuǎn)錄出mRNA，可用分子雜交分子雜交技術(shù)。當培養(yǎng)的神經(jīng)干細胞達到一定密度時，需進行傳代傳代培養(yǎng)以得到更多數(shù)量的細胞，用于神經(jīng)干細胞移植治療實驗。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】BamHⅠ；載體自連；反向連接；正向連接；胰蛋白酶或膠原蛋白；細胞貼壁；分子雜交；傳代
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：14引用：1難度：0.7
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