荸薺又稱馬蹄，是一種果蔬兼用型的經(jīng)濟(jì)作物，在生產(chǎn)實(shí)踐中發(fā)現(xiàn)，洗得干凈的荸薺在貯藏過程中往往比帶泥荸薺更容易失水腐爛。研究者從荸薺表面泥土中分離出一些拮抗細(xì)菌，并發(fā)現(xiàn)2株拮抗細(xì)菌發(fā)酵濾液對(duì)荸薺表面細(xì)菌、霉菌具有顯著的抑制作用，為荸薺貯藏過程中新型生物貯藏保鮮技術(shù)的開發(fā)提供了一定的理論依據(jù)。分離純化拮抗細(xì)菌的操作如下，請(qǐng)回答：
（1）從新鮮的帶泥荸薺中分離出泥土樣后，將樣品稀釋至一定濃度范圍，以保證獲得菌落數(shù)在

30～300

30～300

之間的計(jì)數(shù)平板，進(jìn)行菌落數(shù)量統(tǒng)計(jì)時(shí)，要選取菌落數(shù)目穩(wěn)定時(shí)的記錄作為結(jié)果，這樣可以防止

因培養(yǎng)時(shí)間不足而導(dǎo)致遺漏菌落的數(shù)目

因培養(yǎng)時(shí)間不足而導(dǎo)致遺漏菌落的數(shù)目

。
（2）吸取1mL稀釋液涂布到培養(yǎng)基上培養(yǎng)，制備固體培養(yǎng)基時(shí)應(yīng)加入

瓊脂

瓊脂

，培養(yǎng)基采用

高壓蒸汽滅菌

高壓蒸汽滅菌

法滅菌。
（3）從培養(yǎng)基上挑選出菌落形態(tài)不同的單菌落若干，培養(yǎng)24h后，取菌液劃線于培養(yǎng)基中，獲得單菌落，重復(fù)3次，獲得純化菌株，劃線時(shí)應(yīng)注意從

上次劃線的末端

上次劃線的末端

開始劃；為了防止水蒸氣凝結(jié)成的水珠影響平板內(nèi)菌落生長，培養(yǎng)時(shí)應(yīng)將培養(yǎng)皿

倒置

倒置

。
（4）研究發(fā)現(xiàn)2株細(xì)菌的發(fā)酵液對(duì)荸薺表面細(xì)菌、霉菌具有顯著的抑制作用，為長期保存這兩種菌種，可采用

甘油管藏

甘油管藏

法保存，并放在

-20℃

-20℃

℃的冷凍箱中。