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菁優(yōu)網(wǎng)M基因編碼的M蛋白在動(dòng)物A的肝細(xì)胞中特異性表達(dá)?,F(xiàn)設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn),將外源DNA片段F插入M基因的特定位置,再通過特定生物學(xué)技術(shù)獲得M基因失活的轉(zhuǎn)基因克隆動(dòng)物A,流程如圖所示?;卮鹣铝袉栴}:
(1)在構(gòu)建含有片段F的重組質(zhì)粒過程中,切割質(zhì)粒DNA的工具酶能將特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的
磷酸二酯鍵
磷酸二酯鍵
斷開。
(2)在無(wú)菌、無(wú)毒等適宜環(huán)境中進(jìn)行動(dòng)物A成纖維細(xì)胞的原代和傳代培養(yǎng)時(shí),都要用到胰蛋白酶,作用分別是
將組織分散成細(xì)胞
將組織分散成細(xì)胞
、
使細(xì)胞從瓶壁上脫落
使細(xì)胞從瓶壁上脫落
。培養(yǎng)過程中,需要定期更換培養(yǎng)液,目的有
清除代謝物(,防止對(duì)細(xì)胞造成危害)
清除代謝物(,防止對(duì)細(xì)胞造成危害)
、
給細(xì)胞補(bǔ)充營(yíng)養(yǎng)
給細(xì)胞補(bǔ)充營(yíng)養(yǎng)

(3)與胚胎細(xì)胞核移植技術(shù)相比,體細(xì)胞核移植技術(shù)的成功率更低,原因是
體細(xì)胞分化程度高,恢復(fù)全能性困難
體細(xì)胞分化程度高,恢復(fù)全能性困難
。從早期胚胎中分離獲得的胚胎干細(xì)胞,功能上具有
全能性
全能性

(4)鑒定轉(zhuǎn)基因動(dòng)物:以免疫小鼠的B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行融合,篩選融合雜種細(xì)胞,制備M蛋白的
單克隆抗體
單克隆抗體
。簡(jiǎn)要寫出利用其確定克隆動(dòng)物A中M基因是否失活的實(shí)驗(yàn)思路:
分別提取動(dòng)物A和克隆動(dòng)物A的肝組織蛋白質(zhì),進(jìn)行抗原——抗體雜交
分別提取動(dòng)物A和克隆動(dòng)物A的肝組織蛋白質(zhì),進(jìn)行抗原——抗體雜交
。
(5)獲得克隆動(dòng)物A時(shí),除了轉(zhuǎn)基因技術(shù),還涉及的生物學(xué)技術(shù)有
動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、核移植、胚胎移植
動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、核移植、胚胎移植
。

【答案】磷酸二酯鍵;將組織分散成細(xì)胞;使細(xì)胞從瓶壁上脫落;清除代謝物(,防止對(duì)細(xì)胞造成危害);給細(xì)胞補(bǔ)充營(yíng)養(yǎng);體細(xì)胞分化程度高,恢復(fù)全能性困難;全能性;單克隆抗體;分別提取動(dòng)物A和克隆動(dòng)物A的肝組織蛋白質(zhì),進(jìn)行抗原——抗體雜交;動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、核移植、胚胎移植
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:30引用:1難度:0.6
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    發(fā)布:2024/11/21 15:30:2組卷:83引用:5難度:0.6
  • 2.如圖是四種不同質(zhì)粒的示意圖,其中ori為復(fù)制必需的序列,amp為氨芐青霉素抗性基因,tet為四環(huán)素抗性基因,箭頭表示某種限制性核酸內(nèi)切酶的酶切位點(diǎn)。下列質(zhì)粒中不能作為基因工程載體的是(  )

    發(fā)布:2024/11/28 5:0:2組卷:32引用:2難度:0.8
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    發(fā)布:2024/11/21 23:30:2組卷:53引用:2難度:0.7
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