潮汕生腌海鮮是潮汕等地區(qū)一種獨特的海鮮做法,通常將瀨尿蝦洗凈切段后用生姜、香菜、蒜、小米椒等配料腌制半小時即可食用。經(jīng)查閱,生吃海鮮會有感染沙門氏菌等食源性致病菌的風險?;卮鹣铝袉栴}:
(1)參照食品檢驗標準,先將瀨尿蝦樣品接種在亞硫酸鉍瓊脂(BS)培養(yǎng)基上初篩出疑似菌落。BS培養(yǎng)基中煌綠和亞硫酸鈉能抑制或阻止大腸桿菌、變形桿菌和革蘭氏陽性菌等的生長,沙門氏菌能正常生長。該培養(yǎng)基屬于 選擇選擇(填“選擇”或“鑒別”)培養(yǎng)基,該培養(yǎng)基中添加磷酸氫二鈉的作用是 提供無機鹽、維持滲透壓、pH緩沖物質提供無機鹽、維持滲透壓、pH緩沖物質。(寫出2點即可)
(2)利用沙門氏菌特有的基因進行PCR擴增可以確定疑似菌落是否為沙門氏菌,下表為某同學設計的3對擴增引物,引物在 復性/退火復性/退火階段與模板結合。分別用這3對引物進行PCR后用凝膠電泳進行檢驗,其他條件均相同,引物②組的電泳出現(xiàn)圖2示結果的原因是 自身存在互補序列,降低了引物與模板結合的有效性,未能擴展出目的基因自身存在互補序列,降低了引物與模板結合的有效性,未能擴展出目的基因。
引物 | 引物序列 | 預測產(chǎn)物/bp |
① | F:5′-GTCACGGTGATCGATCCGGT-3′ R:5′-CACGATATTGATATTAGcCcG-3′ |
852 |
② | F:5′-GAAACGTTCCTTCGGAACGTTTC-3′ R:5′-CTGAACGGTCATCCGTTTCTG-3′ |
894 |
③ | F:5′-CCTGGCACCTCGCGCTATAC-3′ R:5′-CCACACACGGATCGTGGCG-3′ |
826 |
稀釋涂布平板
稀釋涂布平板
法接種的5組沙門氏菌平板上。若某組平板上 濾紙片周圍不長菌落的“抑菌圈”平均直徑最大
濾紙片周圍不長菌落的“抑菌圈”平均直徑最大
,則對應配料的抑制效果最好。【答案】選擇;提供無機鹽、維持滲透壓、pH緩沖物質;復性/退火;自身存在互補序列,降低了引物與模板結合的有效性,未能擴展出目的基因;稀釋涂布平板;濾紙片周圍不長菌落的“抑菌圈”平均直徑最大
【解答】
【點評】
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限制酶 BclⅠ NotⅠ XbaⅠ San3AⅠ 識別序列及切割位點 T↓GATCA GC↓GGCCGC T↓CTAGA ↓GATC
a 5'-GCTCTAGAATGCGGGTCAGGGGCCCTCAAGCCATCCTC
b 5'-GTTGCGGCCGCTCACACTCTAGGATCCTTGGTAAGGGACAC
c 5'-GCGATCATGCGGGTCAGGGGCCCTCAAGCCATCCTC
d 5'-GTTTGATCACTCACACTCTAGGATCCTTGGTAAGGGACAC
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