科研人員利用胚胎干細(xì)胞（ES細(xì)胞）對(duì)干擾素基因缺失小鼠進(jìn)行基因治療。其技術(shù)流程如圖一：
（1）步驟①中，在核移植前應(yīng)去除卵母細(xì)胞的細(xì)胞核細(xì)胞核，供核的細(xì)胞通常選用傳代10代以內(nèi)的細(xì)胞，其原因是十代以內(nèi)的細(xì)胞能保持正常的二倍體核型十代以內(nèi)的細(xì)胞能保持正常的二倍體核型。
（2）獲取ES細(xì)胞的來源有早期胚胎或原始性腺早期胚胎或原始性腺。
（3）步驟③中，需要構(gòu)建含有干擾素基因的基因表達(dá)載體基因表達(dá)載體。構(gòu)建前利用PCR技術(shù)擴(kuò)增干擾素基因時(shí)，可以從如圖二A、B、C、D四種單鏈DNA片段中選取B和CB和C作為引物。對(duì)干擾素基因片段和質(zhì)粒進(jìn)行酶切時(shí)，可選用限制酶的組合為HindⅢ和PstⅠ或EcoRⅠ和PstⅠHindⅢ和PstⅠ或EcoRⅠ和PstⅠ。
（4）將步驟③獲得的ES細(xì)胞在熒光顯微鏡下觀察，選擇發(fā)綠綠色熒光的細(xì)胞進(jìn)行體外誘導(dǎo)。為檢測(cè)干擾素基因是否表達(dá)，可以采用抗原-抗體雜交抗原-抗體雜交的方法。
（5）科學(xué)家正在通過蛋白質(zhì)工程技術(shù)將干擾素分子中的一個(gè)半胱氨酸變成絲氨酸，就可以在不影響其活性的前提下延長其保存周期。這項(xiàng)技術(shù)是以蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其與生物功能的關(guān)系蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其與生物功能的關(guān)系為基礎(chǔ)而進(jìn)行的操作。
【考點(diǎn)】干細(xì)胞的培養(yǎng)及其應(yīng)用．
【答案】細(xì)胞核；十代以內(nèi)的細(xì)胞能保持正常的二倍體核型；早期胚胎或原始性腺；基因表達(dá)載體；B和C；HindⅢ和PstⅠ或EcoRⅠ和PstⅠ；綠；抗原-抗體雜交；蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其與生物功能的關(guān)系
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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