擬南芥的耐寒性與AtCOR15a基因受低溫誘導后表達的AtCOR15a蛋白相關(guān)。研究人員將該基因作為目的基因培育抗凍的番茄新品種。圖1、圖2分別為構(gòu)建的能夠表達AtCOR15a的表達載體及培育流程示意圖，請回答下列問題：
（1）要想短時間內(nèi)獲得大量的AtCOR15a基因所采用的技術(shù)為 PCRPCR，該技術(shù)構(gòu)建的反應體系中應加入 AtCOR15a基因（模板DNA）、dNTP、引物、Taq酶、緩沖液AtCOR15a基因（模板DNA）、dNTP、引物、Taq酶、緩沖液?？赏ㄟ^PCR技術(shù)在所有DNA分子中專一性擴增出AtCOR15a基因，其原因是 引物是根據(jù)目的基因的一段已知序列設計合成的引物是根據(jù)目的基因的一段已知序列設計合成的。
（2）位于AtCOR15a基因上游的RD29A是誘導型啟動子，根據(jù)題干信息推測其在轉(zhuǎn)基因植物中的作用是 使目的基因在低溫條件的誘導下開始轉(zhuǎn)錄使目的基因在低溫條件的誘導下開始轉(zhuǎn)錄，表達載體中nptⅡ基因賦予受體細胞抗卡那霉素的能力，其作用是 鑒別受體細胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的受體細胞篩選出來鑒別受體細胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的受體細胞篩選出來。
（3）表達載體構(gòu)建時，AtCOR15a基因和nptⅡ基因應整合在Ti質(zhì)粒的T-DNA內(nèi)部，是因為 Ti質(zhì)粒僅使T-DNA片段可以進入番茄細胞并整合到植物細胞染色體的DNA中Ti質(zhì)粒僅使T-DNA片段可以進入番茄細胞并整合到植物細胞染色體的DNA中。
（4）圖2中擴大培養(yǎng)的培養(yǎng)基類型為 液體液體（填“固體”或“液體”）培養(yǎng)基，③④過程的培養(yǎng)條件是不同的，請列舉兩點 兩培養(yǎng)基的植物激素比例不同、對光照的需求條件也不同兩培養(yǎng)基的植物激素比例不同、對光照的需求條件也不同。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】PCR；AtCOR15a基因（模板DNA）、dNTP、引物、Taq酶、緩沖液；引物是根據(jù)目的基因的一段已知序列設計合成的；使目的基因在低溫條件的誘導下開始轉(zhuǎn)錄；鑒別受體細胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的受體細胞篩選出來；Ti質(zhì)粒僅使T-DNA片段可以進入番茄細胞并整合到植物細胞染色體的DNA中；液體；兩培養(yǎng)基的植物激素比例不同、對光照的需求條件也不同
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：19引用：1難度：0.7
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發(fā)布：2024/12/20 5:0:2組卷：35引用：5難度：0.6 -
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（1）獲得轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種過程中應用的生物技術(shù)有（答出2項）等。
（2）為確保目的基因定向插入了質(zhì)粒，應該選擇（填酶）切割目的基因和質(zhì)粒。在培養(yǎng)基中加入（填“氨芐青霉素”或“四環(huán)素”）對目的基因進行篩選。
（3）培育轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種的核心工作是圖中過程（填序號）。過程②③采用的方法是。
（4）⑤過程需要用到等植物激素，在誘導愈傷組織分化成幼苗的過程中，這兩種植物激素的比例會發(fā)生變化，原因是。發(fā)布：2024/12/20 2:30:1組卷：16引用：5難度：0.5 -
3．如表為5種限制酶的識別序列及切割位點，如圖為某種質(zhì)粒和目的基因，箭頭所指為限制酶酶切位點?，F(xiàn)要將圖中的目的基因定向插入到質(zhì)粒中，以制備轉(zhuǎn)基因植株。下列說法正確的是（ ?。?
限制酶 BamHⅠ EcoRⅠ HindⅠ NbeⅠ MunⅠ 識別序列及切割位點 G↓CATCC G↓AATTC A↓AGCTT G↓CTAGC C↓AATTG 
發(fā)布：2024/12/20 3:30:1組卷：6引用：1難度：0.6
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