苯丙酮尿癥是由PKU基因突變引起的，基因定點(diǎn)整合可以將正常PKU基因定點(diǎn)整合到PKU基因突變的小鼠胚胎干細(xì)胞的染色體DNA上，替換突變基因，用于研究該病的治療?；蚨c(diǎn)整合的過(guò)程是：從染色體DNA的突變PKU基因兩側(cè)各選擇一段DNA序列HB1和HB2，根據(jù)其堿基序列分別合成HB1和HB2，再將兩者分別與基因K1、K2連接，中間插入正常PKU基因和標(biāo)記基因neor，構(gòu)建出如圖所示的重組載體。重組載體和染色體DNA中的HB1和HB2序列發(fā)生交換，導(dǎo)致兩者之間區(qū)域發(fā)生互換（如圖）。
（1）構(gòu)建重組載體時(shí)，需采用PCR技術(shù)對(duì)PKU基因進(jìn)行擴(kuò)增，PCR擴(kuò)增的原理是 DNA復(fù)制DNA復(fù)制。擴(kuò)增時(shí)，需要先加熱至90～95℃使DNA解鏈后，后冷卻至55～60℃的目的是 使引物和模板鏈互補(bǔ)配對(duì)使引物和模板鏈互補(bǔ)配對(duì)。
（2）重組載體中的HB1和HB2之間除了插入正常的PKU基因和neor基因以外，還必須含有 啟動(dòng)子、終止子啟動(dòng)子、終止子。neor基因的作用是 選擇出成功導(dǎo)入目的基因的受體細(xì)胞選擇出成功導(dǎo)入目的基因的受體細(xì)胞。
（3）用圖中重組載體轉(zhuǎn)化時(shí)，會(huì)出現(xiàn)一些PKU基因錯(cuò)誤整合的胚胎干細(xì)胞。錯(cuò)誤整合時(shí)，載體的兩個(gè)K基因中至少會(huì)有一個(gè)與neor基因一起整合到染色體DNA上，已知含有neor基因的細(xì)胞具有G418的抗性。K1、K2的產(chǎn)物都能把DHPG轉(zhuǎn)化成有毒物質(zhì)而使細(xì)胞死亡。根據(jù)上述信息，設(shè)計(jì)簡(jiǎn)要的實(shí)驗(yàn)方案從轉(zhuǎn)化的胚胎干細(xì)胞中篩選出正確整合的胚胎干細(xì)胞 用添加有G418、DHPG的培養(yǎng)液培養(yǎng)整合后的細(xì)胞，能存活的是正確整合的胚胎干細(xì)胞用添加有G418、DHPG的培養(yǎng)液培養(yǎng)整合后的細(xì)胞，能存活的是正確整合的胚胎干細(xì)胞。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過(guò)程綜合．
【答案】DNA復(fù)制；使引物和模板鏈互補(bǔ)配對(duì)；啟動(dòng)子、終止子；選擇出成功導(dǎo)入目的基因的受體細(xì)胞；用添加有G418、DHPG的培養(yǎng)液培養(yǎng)整合后的細(xì)胞，能存活的是正確整合的胚胎干細(xì)胞
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
聲明：本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有，未經(jīng)書(shū)面同意，不得復(fù)制發(fā)布。
發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：15引用：1難度：0.4
相似題
-
1．紅細(xì)胞生成素（EPO）是人體內(nèi)促進(jìn)紅細(xì)胞生成的一種糖蛋白，可用于治療腎衰性貧血等疾病。由于天然 EPO來(lái)源極為有限，某科研團(tuán)隊(duì)采用基因工程培育轉(zhuǎn)基因羊作為乳腺生物反應(yīng)器，使其能合成EPO。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/20 5:0:2組卷：35引用：5難度：0.6 -
2．煙草是我國(guó)一些地區(qū)的經(jīng)濟(jì)作物之一，提高煙草質(zhì)量有利于提高經(jīng)濟(jì)收入。我國(guó)科研團(tuán)隊(duì)研究了一種轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種，抗鹽基因的結(jié)構(gòu)和獲得轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種過(guò)程（①～⑤）如圖所示?；卮鹣铝袉?wèn)題：
（1）獲得轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種過(guò)程中應(yīng)用的生物技術(shù)有（答出2項(xiàng)）等。
（2）為確保目的基因定向插入了質(zhì)粒，應(yīng)該選擇（填酶）切割目的基因和質(zhì)粒。在培養(yǎng)基中加入（填“氨芐青霉素”或“四環(huán)素”）對(duì)目的基因進(jìn)行篩選。
（3）培育轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種的核心工作是圖中過(guò)程（填序號(hào)）。過(guò)程②③采用的方法是。
（4）⑤過(guò)程需要用到等植物激素，在誘導(dǎo)愈傷組織分化成幼苗的過(guò)程中，這兩種植物激素的比例會(huì)發(fā)生變化，原因是。發(fā)布：2024/12/20 2:30:1組卷：16引用：5難度：0.5 -
3．如表為5種限制酶的識(shí)別序列及切割位點(diǎn)，如圖為某種質(zhì)粒和目的基因，箭頭所指為限制酶酶切位點(diǎn)?，F(xiàn)要將圖中的目的基因定向插入到質(zhì)粒中，以制備轉(zhuǎn)基因植株。下列說(shuō)法正確的是（ ）
限制酶 BamHⅠ EcoRⅠ HindⅠ NbeⅠ MunⅠ 識(shí)別序列及切割位點(diǎn) G↓CATCC G↓AATTC A↓AGCTT G↓CTAGC C↓AATTG 
發(fā)布：2024/12/20 3:30:1組卷：6引用：1難度：0.6
把好題分享給你的好友吧~~