CAR—T細(xì)胞療法是通過(guò)設(shè)計(jì)CAR基因，并導(dǎo)入癌癥患者的T細(xì)胞中，使其轉(zhuǎn)化為CAR-T細(xì)胞，CAR-T細(xì)胞膜上的CAR蛋白與癌細(xì)胞表面抗原特異結(jié)合后，激活CAR-T細(xì)胞使其增殖、分化，從而實(shí)現(xiàn)對(duì)癌細(xì)胞的特異性殺傷和記憶，主要過(guò)程如下圖。
請(qǐng)回答：
（1）要獲取CAR基因，可采取PCR技術(shù)進(jìn)行大量擴(kuò)增，前提是 CAR基因序列已知CAR基因序列已知。
（2）連接形成pCDH—CAR上除了目的基因外，還有一些必須的部分，比如啟動(dòng)子和終止子，其中啟動(dòng)子是 RNA聚合酶RNA聚合酶識(shí)別結(jié)合位點(diǎn)。
（3）完成過(guò)程②常用方法是 顯微注射顯微注射法。此外，還可以先將CAR基因整合到逆轉(zhuǎn)錄病毒載體中，將CAR基因整合到T細(xì)胞的 染色體DNA染色體DNA上。
（4）檢測(cè)CAR-T細(xì)胞中的CAR基因是否表達(dá)了所采用的方法是 抗原-抗體雜交技術(shù)抗原-抗體雜交技術(shù)。
（5）在將CAR-T細(xì)胞輸給病人進(jìn)行治療之前，還需在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)進(jìn)行細(xì)胞擴(kuò)增培養(yǎng)。體外培養(yǎng)CAR-T細(xì)胞的培養(yǎng)液中除合成培養(yǎng)基的成分外，一般還需添加 動(dòng)物血清動(dòng)物血清等天然成分。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過(guò)程綜合．
【答案】CAR基因序列已知；RNA聚合酶；顯微注射；染色體DNA；抗原-抗體雜交技術(shù)；動(dòng)物血清
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布：2024/6/21 8:0:10組卷：1引用：1難度：0.6
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發(fā)布：2024/12/20 5:0:2組卷：35引用：5難度：0.6 -
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（1）獲得轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種過(guò)程中應(yīng)用的生物技術(shù)有（答出2項(xiàng)）等。
（2）為確保目的基因定向插入了質(zhì)粒，應(yīng)該選擇（填酶）切割目的基因和質(zhì)粒。在培養(yǎng)基中加入（填“氨芐青霉素”或“四環(huán)素”）對(duì)目的基因進(jìn)行篩選。
（3）培育轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種的核心工作是圖中過(guò)程（填序號(hào)）。過(guò)程②③采用的方法是。
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3．如表為5種限制酶的識(shí)別序列及切割位點(diǎn)，如圖為某種質(zhì)粒和目的基因，箭頭所指為限制酶酶切位點(diǎn)?，F(xiàn)要將圖中的目的基因定向插入到質(zhì)粒中，以制備轉(zhuǎn)基因植株。下列說(shuō)法正確的是（ ）
限制酶 BamHⅠ EcoRⅠ HindⅠ NbeⅠ MunⅠ 識(shí)別序列及切割位點(diǎn) G↓CATCC G↓AATTC A↓AGCTT G↓CTAGC C↓AATTG 
發(fā)布：2024/12/20 3:30:1組卷：6引用：1難度：0.6
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