圖1為生產(chǎn)轉(zhuǎn)基因抗蟲棉時(shí)使用的質(zhì)粒，圖2為生產(chǎn)轉(zhuǎn)基因抗蟲棉時(shí)所用目的基因側(cè)翼涉及的限制酶的酶切位點(diǎn)。
（1）為了高效地構(gòu)建基因表達(dá)載體，最好選用 HindⅢ和BamHⅠHindⅢ和BamHⅠ（填限制酶名稱）同時(shí)酶切質(zhì)粒和目的基因。
（2）為了篩選出基因表達(dá)載體，需要將DNA連接酶處理后的溶液與大腸桿菌混合在一起進(jìn)行培養(yǎng)。為了促使大腸桿菌吸收外源DNA，需要用 CaCl2 或（Ca2+）CaCl2 或（Ca2+）處理大腸桿菌使其處于感受態(tài)。隨后再將大腸桿菌涂布在含 氨苯青霉素氨苯青霉素的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，一般情況下這樣培養(yǎng)出來的大腸桿菌有兩種類型：一種是結(jié)合了目的基因的質(zhì)粒，一種是未結(jié)合目的基因的質(zhì)粒。可以加入 HindⅢ和BamHⅠHindⅢ和BamHⅠ分別去切割兩種質(zhì)粒，其中結(jié)合了目的基因的質(zhì)粒在酶切后能產(chǎn)生目的基因。
（3）圖示質(zhì)粒在設(shè)計(jì)時(shí)插入了T-DNA序列，并且將啟動子、多克隆位點(diǎn)和終止子序列插入到T-DNA中（注：插入不會破壞T-DNA的作用），T-DNA的作用是 將 T‐DNA 之間的DNA序列轉(zhuǎn)移并整合至受體細(xì)胞的染色體DNA上將 T‐DNA 之間的DNA序列轉(zhuǎn)移并整合至受體細(xì)胞的染色體DNA上。
（4）有人擔(dān)心基因工程中使用的抗性基因可轉(zhuǎn)移至近緣生物中，本例中的質(zhì)粒能否有助于降低氨芐青霉素抗性基因轉(zhuǎn)移到近緣生物的風(fēng)險(xiǎn)？為什么？
【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合．
【答案】HindⅢ和BamHⅠ；CaCl2 或（Ca2+）；氨苯青霉素；HindⅢ和BamHⅠ；將 T‐DNA 之間的DNA序列轉(zhuǎn)移并整合至受體細(xì)胞的染色體DNA上
【解答】
【點(diǎn)評】
聲明：本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有，未經(jīng)書面同意，不得復(fù)制發(fā)布。
發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：15引用：3難度：0.7
相似題
-
1．紅細(xì)胞生成素（EPO）是人體內(nèi)促進(jìn)紅細(xì)胞生成的一種糖蛋白，可用于治療腎衰性貧血等疾病。由于天然 EPO來源極為有限，某科研團(tuán)隊(duì)采用基因工程培育轉(zhuǎn)基因羊作為乳腺生物反應(yīng)器，使其能合成EPO。下列有關(guān)敘述錯誤的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/20 5:0:2組卷：35引用：5難度：0.6 -
2．煙草是我國一些地區(qū)的經(jīng)濟(jì)作物之一，提高煙草質(zhì)量有利于提高經(jīng)濟(jì)收入。我國科研團(tuán)隊(duì)研究了一種轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種，抗鹽基因的結(jié)構(gòu)和獲得轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種過程（①～⑤）如圖所示。回答下列問題：
（1）獲得轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種過程中應(yīng)用的生物技術(shù)有（答出2項(xiàng)）等。
（2）為確保目的基因定向插入了質(zhì)粒，應(yīng)該選擇（填酶）切割目的基因和質(zhì)粒。在培養(yǎng)基中加入（填“氨芐青霉素”或“四環(huán)素”）對目的基因進(jìn)行篩選。
（3）培育轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種的核心工作是圖中過程（填序號）。過程②③采用的方法是。
（4）⑤過程需要用到等植物激素，在誘導(dǎo)愈傷組織分化成幼苗的過程中，這兩種植物激素的比例會發(fā)生變化，原因是。發(fā)布：2024/12/20 2:30:1組卷：16引用：5難度：0.5 -
3．如表為5種限制酶的識別序列及切割位點(diǎn)，如圖為某種質(zhì)粒和目的基因，箭頭所指為限制酶酶切位點(diǎn)?，F(xiàn)要將圖中的目的基因定向插入到質(zhì)粒中，以制備轉(zhuǎn)基因植株。下列說法正確的是（ ?。?
限制酶 BamHⅠ EcoRⅠ HindⅠ NbeⅠ MunⅠ 識別序列及切割位點(diǎn) G↓CATCC G↓AATTC A↓AGCTT G↓CTAGC C↓AATTG 
發(fā)布：2024/12/20 3:30:1組卷：6引用：1難度：0.6
把好題分享給你的好友吧~~