CRISPR/Cas9是一種基因編輯技術(shù)，在腫瘤治療領(lǐng)域展現(xiàn)出極大的應(yīng)用前景。
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（1）該技術(shù)的原理如圖1，是由向?qū)NA按照

堿基互補配對

堿基互補配對

原則與目標DNA結(jié)合，引導核酸內(nèi)切酶Cas9對目標DNA進行切割造成雙鏈斷裂，細胞修復斷裂的平末端雙鏈DNA時有兩種途徑：非同源末端連接途徑（NHEJ）會在連接處隨機插入、刪除或替換部分堿基對，從而引發(fā)

基因突變

基因突變

；同源重組修復途徑（HDR）即在外源供體DNA存在的情況下，供體DNA有幾率通過同源重組的方式與切口處附近的基因組DNA進行堿基片段交換，完成末端連接修復，同時實現(xiàn)精確的基因編輯。
（2）將Cas9和向?qū)NA基因等元件導入人體細胞，對突變的

原癌和抑癌

原癌和抑癌

基因進行修復是腫瘤治療的思路，該方法中修復DNA雙鏈應(yīng)利用上述

HDR

HDR

（填“NHEI”或“HDR”）途徑。但Cas9基因太大，超過載體的裝載能力，以及缺乏可控性是臨床應(yīng)用的難點。
（3）為了解決Cas9基因太大的問題，科研人員將Cas9折成兩個肽段：Cas9N和Cas9C，分開時缺乏核酸酶活性，利用兩種能自發(fā)結(jié)合的蛋白Coh2和DocS，實現(xiàn)Cas9兩個肽段的拼接，獲得有活性的Cas9。基于以上原理構(gòu)建轉(zhuǎn)基因小鼠，圖2所示表達載體①處可選擇

E

E

，②處可選擇

F

F

。（選填字母編號）
A.Cas9N基因
B.Cas9C基因
C.完整的Cas9基因
D.Coh2和DocS的融合基因
E.DocS和Cas9C的融合基因
F.Coh2和Cas9N的融合基因
G.DocS和Cas9N的融合基因
（4）在可控性方面，研究人員開發(fā)了“光啟“基因編輯工作系統(tǒng)（FAST），原理如下：細菌中的S蛋白能被遠紅光激活，釋放信號；放線菌中的D蛋白，接收到該信號后能結(jié)合DNA?？蒲腥藛T將S蛋白基因、D蛋白和轉(zhuǎn)錄激活因子（能結(jié)合上述啟動子1并激活轉(zhuǎn)錄）融合基因與基因編輯系統(tǒng)一同導入小鼠（啟動子2不受誘導，持續(xù)轉(zhuǎn)錄）。結(jié)合（3）補充FAST原理：
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（5）科研人員將FAST轉(zhuǎn)入腫瘤模型小鼠體內(nèi)，實驗分組及結(jié)果如圖3所示（遠紅光照射方法為連續(xù)7天每天對腫瘤部位進行4小時照射），結(jié)果說明該方法有效。結(jié)合上述研究說明FAST比普通CRlSPR/Cas9技術(shù)的優(yōu)越之處：

基因編輯的可控性好，只有遠紅光照射特定時間段內(nèi)，才啟動對腫瘤細胞的突變原癌或抑癌基因剪切與修復；安全性高，降低對正常細胞的相關(guān)基因的剪切，降低治療的副作用

基因編輯的可控性好，只有遠紅光照射特定時間段內(nèi)，才啟動對腫瘤細胞的突變原癌或抑癌基因剪切與修復；安全性高，降低對正常細胞的相關(guān)基因的剪切，降低治療的副作用

。（至少兩點）。