新冠病毒（+RNA）的刺突蛋白S通過與人體黏膜細(xì)胞表面的ACE2受體結(jié)合而進(jìn)入細(xì)胞，是宿主抗體的重要作用位點(diǎn)。下圖1是科研人員利用新冠病毒的+RNA提取S蛋白基因和S蛋白受體結(jié)合域RBD基因作為抗原基因序列，研制新冠病毒雙抗原疫苗的技術(shù)路線。已知PCR1與PCR2要分別進(jìn)行，然后將產(chǎn)物混合，使用引物1和引物4進(jìn)行PCR3，最終獲得大量S-RBD融合基因（1300bp）。
（1）PCR3過程中，片段1與片段2連接形成S-RBD融合基因，需要使用 耐高溫DNA聚合耐高溫DNA聚合酶，該酶的作用是 將單個(gè)的脫氧核苷酸連接到引物的3'端將單個(gè)的脫氧核苷酸連接到引物的3'端。
（2）為使S-RBD融合基因在工程菌中表達(dá)時(shí)，先合成S蛋白，在重組pX質(zhì)粒中，引物4對(duì)應(yīng)的區(qū)段要連接在靠近 啟動(dòng)子啟動(dòng)子（填“啟動(dòng)子“或“終止子”）的部位，原因是 原核細(xì)胞中基因表達(dá)時(shí)可以邊轉(zhuǎn)錄邊翻譯，引物4對(duì)應(yīng)的區(qū)段靠近啟動(dòng)子時(shí)先轉(zhuǎn)錄出S蛋白的mRNA序列原核細(xì)胞中基因表達(dá)時(shí)可以邊轉(zhuǎn)錄邊翻譯，引物4對(duì)應(yīng)的區(qū)段靠近啟動(dòng)子時(shí)先轉(zhuǎn)錄出S蛋白的mRNA序列。
（3）為初步檢測(cè)過程B構(gòu)建是否成功，對(duì)重組pX系列質(zhì)粒及其酶切產(chǎn)物進(jìn)行凝膠電泳檢測(cè)，結(jié)果如圖2。據(jù)圖可知，酶切時(shí)用到的酶是 HindⅢ、Ndel、EcoRIHindⅢ、Ndel、EcoRI，重組質(zhì)粒pX2和pX5構(gòu)建成功的依據(jù)是 重組質(zhì)粒pX2和pX5酶切后形成的750和550片段堿基對(duì)總和為S—RBD融合基因長(zhǎng)度1300重組質(zhì)粒pX2和pX5酶切后形成的750和550片段堿基對(duì)總和為S—RBD融合基因長(zhǎng)度1300。
（4）在工程菌的篩選時(shí)，可先后用兩種抗生素進(jìn)行影印培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)（將首次培養(yǎng)的菌落用滅菌絨布沾取印到新培養(yǎng)基上培養(yǎng)），在第二次培養(yǎng)時(shí)存活的菌落是否含有目的基因 否否（填“是”或“否”）。鑒定pX質(zhì)粒是否導(dǎo)入工程菌還可以采用的方法是 觀察菌落是否具有熒光，有熒光的則含有pX質(zhì)粒觀察菌落是否具有熒光，有熒光的則含有pX質(zhì)粒。
（5）試從免疫學(xué)角度分析此種雙抗原疫苗比常規(guī)S蛋白疫苗更具優(yōu)勢(shì)的原因 此種雙抗原疫苗含有S蛋白受體結(jié)合域RBD，有利于進(jìn)入靶細(xì)胞，從而激發(fā)細(xì)胞免疫此種雙抗原疫苗含有S蛋白受體結(jié)合域RBD，有利于進(jìn)入靶細(xì)胞，從而激發(fā)細(xì)胞免疫。
【答案】耐高溫DNA聚合；將單個(gè)的脫氧核苷酸連接到引物的3'端；啟動(dòng)子；原核細(xì)胞中基因表達(dá)時(shí)可以邊轉(zhuǎn)錄邊翻譯，引物4對(duì)應(yīng)的區(qū)段靠近啟動(dòng)子時(shí)先轉(zhuǎn)錄出S蛋白的mRNA序列；HindⅢ、Ndel、EcoRI；重組質(zhì)粒pX2和pX5酶切后形成的750和550片段堿基對(duì)總和為S—RBD融合基因長(zhǎng)度1300；否；觀察菌落是否具有熒光，有熒光的則含有pX質(zhì)粒；此種雙抗原疫苗含有S蛋白受體結(jié)合域RBD，有利于進(jìn)入靶細(xì)胞，從而激發(fā)細(xì)胞免疫
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：17引用：2難度：0.5
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1．紅細(xì)胞生成素（EPO）是人體內(nèi)促進(jìn)紅細(xì)胞生成的一種糖蛋白，可用于治療腎衰性貧血等疾病。由于天然 EPO來源極為有限，某科研團(tuán)隊(duì)采用基因工程培育轉(zhuǎn)基因羊作為乳腺生物反應(yīng)器，使其能合成EPO。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/20 5:0:2組卷：35引用：5難度：0.6 -
2．煙草是我國一些地區(qū)的經(jīng)濟(jì)作物之一，提高煙草質(zhì)量有利于提高經(jīng)濟(jì)收入。我國科研團(tuán)隊(duì)研究了一種轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種，抗鹽基因的結(jié)構(gòu)和獲得轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種過程（①～⑤）如圖所示?；卮鹣铝袉栴}：
（1）獲得轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種過程中應(yīng)用的生物技術(shù)有（答出2項(xiàng)）等。
（2）為確保目的基因定向插入了質(zhì)粒，應(yīng)該選擇（填酶）切割目的基因和質(zhì)粒。在培養(yǎng)基中加入（填“氨芐青霉素”或“四環(huán)素”）對(duì)目的基因進(jìn)行篩選。
（3）培育轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種的核心工作是圖中過程（填序號(hào)）。過程②③采用的方法是。
（4）⑤過程需要用到等植物激素，在誘導(dǎo)愈傷組織分化成幼苗的過程中，這兩種植物激素的比例會(huì)發(fā)生變化，原因是。發(fā)布：2024/12/20 2:30:1組卷：16引用：5難度：0.5 -
3．如表為5種限制酶的識(shí)別序列及切割位點(diǎn)，如圖為某種質(zhì)粒和目的基因，箭頭所指為限制酶酶切位點(diǎn)?，F(xiàn)要將圖中的目的基因定向插入到質(zhì)粒中，以制備轉(zhuǎn)基因植株。下列說法正確的是（ ?。?
限制酶 BamHⅠ EcoRⅠ HindⅠ NbeⅠ MunⅠ 識(shí)別序列及切割位點(diǎn) G↓CATCC G↓AATTC A↓AGCTT G↓CTAGC C↓AATTG 
發(fā)布：2024/12/20 3:30:1組卷：6引用：1難度：0.6
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