利用轉(zhuǎn)基因奶牛乳腺生物反應器生產(chǎn)人的生長激素，需要構建一種能高水平表達的基因表達載體，選擇合適的基因啟動子至關重要．由于無法由基因表達產(chǎn)物推知啟動子的堿基序列，運用PCR技術單獨克隆啟動子存在困難．科研人員經(jīng)過長期研究，終于發(fā)明了下圖所示的一種克隆啟動子的方法．請分析回答：
（1）培育轉(zhuǎn)基因奶牛時，需要在生長激素基因編碼序列前插入乳腺蛋白基因乳腺蛋白基因的啟動子；構建的基因表達載體導入動物受精卵常用顯微注射顯微注射技術．
（2）由基因表達產(chǎn)物無法推知啟動子堿基序列，其原因是基因中啟動子的堿基序列不能被轉(zhuǎn)錄基因中啟動子的堿基序列不能被轉(zhuǎn)錄．
（3）過程①需選擇的限制酶是BamHⅠBamHⅠ，過程③需選擇的限制酶是HindⅢHindⅢ．過程④需要使用的工具酶是熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）．
（4）過程④中可以根據(jù)編碼序列兩端的部分堿基序列設計引物引物進行擴增．運用PCR擴增DNA片段的原理是DNA雙鏈復制DNA雙鏈復制．
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】乳腺蛋白基因；顯微注射；基因中啟動子的堿基序列不能被轉(zhuǎn)錄；BamHⅠ；HindⅢ；熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）；引物；DNA雙鏈復制
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：45引用：3難度：0.9
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發(fā)布：2024/12/20 5:0:2組卷：35引用：5難度：0.6 -
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（1）獲得轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種過程中應用的生物技術有（答出2項）等。
（2）為確保目的基因定向插入了質(zhì)粒，應該選擇（填酶）切割目的基因和質(zhì)粒。在培養(yǎng)基中加入（填“氨芐青霉素”或“四環(huán)素”）對目的基因進行篩選。
（3）培育轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種的核心工作是圖中過程（填序號）。過程②③采用的方法是。
（4）⑤過程需要用到等植物激素，在誘導愈傷組織分化成幼苗的過程中，這兩種植物激素的比例會發(fā)生變化，原因是。發(fā)布：2024/12/20 2:30:1組卷：16引用：5難度：0.5 -
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限制酶 BamHⅠ EcoRⅠ HindⅠ NbeⅠ MunⅠ 識別序列及切割位點 G↓CATCC G↓AATTC A↓AGCTT G↓CTAGC C↓AATTG 
發(fā)布：2024/12/20 3:30:1組卷：6引用：1難度：0.6
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