噬菌體展示技術是將外源目標基因插入到噬菌體外殼蛋白結構基因的適當位置,使目標蛋白被展示到噬菌體表面的生物技術(如圖所示)。被展示的蛋白質(zhì)可以保持相對獨立的空間結構和生物活性,以利于靶分子的識別和結合。請分析回答:
(1)插入載體之前,目標基因一般需經(jīng)PCR擴增。PCR擴增基因的原理是 DNA的半保留復制DNA的半保留復制。若目標基因的核苷酸序列未知,但已知其臨近區(qū)域的上、下游的部分序列如下所示,請從表中所列引物中選出一對合適的引物用于目標基因的PCR擴增:乙和C乙和C。
5′-GACGCATTACGGTAAC??????TCCAGCTTAGCAGTAA-3′
3′-CTGCGTAATGCCATTG??????AGGTCGAATCGTCATT-5′
引物Ⅰ | 引物Ⅱ | ||
甲 | 5′-CTGCGTAATGCCATTG | A | 5′-AGGTCGAATCGTCATT |
乙 | 5′-GACGCATTACGGTAAC | B | 5′-TCCAGCTTAGCAGTAA |
丙 | 5′-GTTACCGTAATGCGTC | C | 5′-TTACTGCTAAGCTGGA |
丁 | 5′-CAATGGCATTACGCAG | D | 5′-AATGACGATTCGACCT |
它們的基本組成單位都是脫氧核苷酸,且都具有雙鏈(雙螺旋)結構
它們的基本組成單位都是脫氧核苷酸,且都具有雙鏈(雙螺旋)結構
;建立噬菌體展示庫需用的工具酶有 限制酶和DNA連接酶
限制酶和DNA連接酶
。(3)目標蛋白的篩選利用了
抗原—抗體雜交
抗原—抗體雜交
方法,其原理是 抗體的結合具有特異性
抗體的結合具有特異性
。(4)擴大培養(yǎng)時,進行誘變處理的目的可能是通過提高某些基因的突變率而獲取
具有更強生產(chǎn)目標蛋白能力的噬菌體
具有更強生產(chǎn)目標蛋白能力的噬菌體
;根據(jù)噬菌體的特征,擴大培養(yǎng)體系中必須含有 宿主細胞
宿主細胞
,噬菌體才能繁殖。多次篩選后,目標基因高效表達
目標基因高效表達
的噬菌體得到高度富集。【考點】噬菌體侵染細菌實驗;目的基因的篩選與獲取.
【答案】DNA的半保留復制;乙和C;它們的基本組成單位都是脫氧核苷酸,且都具有雙鏈(雙螺旋)結構;限制酶和DNA連接酶;抗原—抗體雜交;抗體的結合具有特異性;具有更強生產(chǎn)目標蛋白能力的噬菌體;宿主細胞;目標基因高效表達
【解答】
【點評】
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發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:4引用:1難度:0.6
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