腺病毒能引起人呼吸系統(tǒng)不適等癥狀，但致死率低。研究發(fā)現(xiàn)該病毒可作為基因工程的載體。陳薇等科學(xué)家研發(fā)了以人5型腺病毒（Ad5）為載體的重組新冠疫苗，這是國內(nèi)第一個進入臨床試驗階段的新冠疫苗。腺病毒載體疫苗生產(chǎn)過程示意圖如下：
回答下列問題：
（1）在制備人腎上皮細胞系（293細胞）時，發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)一段時間，細胞鋪滿培養(yǎng)瓶后不再分裂，這種現(xiàn)象稱為接觸抑制接觸抑制。出現(xiàn)此現(xiàn)象后，需用胰蛋白酶胰蛋白酶處理，得到細胞懸液，再進行傳代傳代培養(yǎng)，以獲得更多的293細胞。
（2）新冠病毒為RNA病毒，其遺傳物質(zhì)不能直接拼接到質(zhì)粒上，因此在制備以上疫苗時需先通過逆轉(zhuǎn)錄逆轉(zhuǎn)錄過程獲得相應(yīng)的DNA．構(gòu)建重組腺病毒穿梭質(zhì)粒，可使用雙酶切法，使之產(chǎn)生不同不同的粘性末端以提高目的基因與質(zhì)粒重組的成功率。據(jù)圖可知需將重組腺病毒穿梭質(zhì)粒和輔助質(zhì)粒重組腺病毒穿梭質(zhì)粒和輔助質(zhì)粒導(dǎo)入293細胞，從而獲得轉(zhuǎn)基因腺病毒。
（3）檢測轉(zhuǎn)基因腺病毒攜帶的目的基因是否在人體細胞內(nèi)表達，可檢測細胞內(nèi)是否含有相應(yīng)的mRNAmRNA或抗原分子，若檢測抗原分子可用單克隆抗體制備單克隆抗體制備技術(shù)獲得特異性探針。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】接觸抑制；胰蛋白酶；傳代；逆轉(zhuǎn)錄；不同；重組腺病毒穿梭質(zhì)粒和輔助質(zhì)粒；mRNA；單克隆抗體制備
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：19引用：1難度：0.6
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發(fā)布：2024/12/20 5:0:2組卷：35引用：5難度：0.6 -
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（1）獲得轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種過程中應(yīng)用的生物技術(shù)有（答出2項）等。
（2）為確保目的基因定向插入了質(zhì)粒，應(yīng)該選擇（填酶）切割目的基因和質(zhì)粒。在培養(yǎng)基中加入（填“氨芐青霉素”或“四環(huán)素”）對目的基因進行篩選。
（3）培育轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種的核心工作是圖中過程（填序號）。過程②③采用的方法是。
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發(fā)布：2024/12/20 3:30:1組卷：6引用：1難度：0.6
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