為培育含油量高的油菜，研究人員嘗試?yán)没蚬こ痰燃夹g(shù)獲得了轉(zhuǎn)基因油菜品種?；卮饐栴}：
（1）研究人員依據(jù)基因的已知序列設(shè)計(jì)引物，采用PCR技術(shù)從陸地棉基因文庫中獲取酶D基因，從擬南芥基因中獲取轉(zhuǎn)運(yùn)肽基因，所含限制酶（ClaⅠ、SacⅠ、XbaⅠ）的酶切位點(diǎn)如圖甲所示。
若用ClaⅠClaⅠ和DNA連接DNA連接酶處理酶D基因和轉(zhuǎn)運(yùn)肽基因后，可得到A端與DD端（填圖中字母）相連的重組基因。
（2）將上述重組基因進(jìn)一步處理，插入圖乙所示T質(zhì)粒的T-DNA中，T-DNA上有SacⅠ、XbaⅠSacⅠ、XbaⅠ限制酶切位點(diǎn)，構(gòu)建基因表達(dá)載體基因表達(dá)載體并導(dǎo)入農(nóng)桿菌中。將獲得的農(nóng)桿菌接種在含四環(huán)素四環(huán)素的固體平板上培養(yǎng)得到含重組基因的單菌落，再利用液體培養(yǎng)基振蕩培養(yǎng)，可以得到用于轉(zhuǎn)化的侵染液。
（3）剪取油菜的葉片放入侵染液中一段時(shí)間，此過程的目的是利用農(nóng)桿菌將重組基因?qū)胗筒思?xì)胞利用農(nóng)桿菌將重組基因?qū)胗筒思?xì)胞，進(jìn)一步篩選后獲得轉(zhuǎn)基因油菜細(xì)胞，該細(xì)胞通過植物組織培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)技術(shù)，可培育成轉(zhuǎn)基因油菜植株，其主要原理是植物細(xì)胞的全能性植物細(xì)胞的全能性。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合．
【答案】ClaⅠ；DNA連接；D；SacⅠ、XbaⅠ；基因表達(dá)載體；四環(huán)素；利用農(nóng)桿菌將重組基因?qū)胗筒思?xì)胞；植物組織培養(yǎng)；植物細(xì)胞的全能性
【解答】
【點(diǎn)評】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：8引用：1難度：0.7
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發(fā)布：2024/12/20 5:0:2組卷：35引用：5難度：0.6 -
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（2）為確保目的基因定向插入了質(zhì)粒，應(yīng)該選擇（填酶）切割目的基因和質(zhì)粒。在培養(yǎng)基中加入（填“氨芐青霉素”或“四環(huán)素”）對目的基因進(jìn)行篩選。
（3）培育轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種的核心工作是圖中過程（填序號）。過程②③采用的方法是。
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限制酶 BamHⅠ EcoRⅠ HindⅠ NbeⅠ MunⅠ 識別序列及切割位點(diǎn) G↓CATCC G↓AATTC A↓AGCTT G↓CTAGC C↓AATTG 
發(fā)布：2024/12/20 3:30:1組卷：6引用：1難度：0.6
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