突尼斯軟籽石榴是一種熱門水果,深受大家喜愛,但其抗寒能力差,這成為限制該種石榴栽培的重要因素。科學(xué)家們利用基因工程對(duì)其進(jìn)行定向改造,以得到抗寒性強(qiáng)的優(yōu)良品種。如圖表示構(gòu)建基因表達(dá)載體的方法,圖中標(biāo)注的是限制酶的酶切位點(diǎn),請(qǐng)回答下列問題:
(1)在切割目的基因時(shí)選擇的兩種限制酶最好為SmaI和PstISmaI和PstI,選擇兩種限制酶的優(yōu)勢(shì)是可避免質(zhì)粒自身成環(huán)和質(zhì)粒與目的基因的反向連接質(zhì)粒自身成環(huán)和質(zhì)粒與目的基因的反向連接。
(2)可通過PCRPCR技術(shù)對(duì)獲得的抗寒基因進(jìn)行體外擴(kuò)增,該過程使DNA解旋的方法與細(xì)胞內(nèi)復(fù)制時(shí)的差異是體外擴(kuò)增目的基因利用加熱至90~95℃的高溫使DNA解旋,細(xì)胞內(nèi)復(fù)制目的基因使用解旋酶使DNA解旋體外擴(kuò)增目的基因利用加熱至90~95℃的高溫使DNA解旋,細(xì)胞內(nèi)復(fù)制目的基因使用解旋酶使DNA解旋,體外擴(kuò)增時(shí)使用的酶具有的顯著特點(diǎn)是耐高溫(或具有熱穩(wěn)定性)耐高溫(或具有熱穩(wěn)定性)。
(3)將重組質(zhì)粒導(dǎo)入經(jīng)脫分化脫分化(過程)培養(yǎng)成的軟籽石榴的愈傷組織中常用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合.
【答案】SmaI和PstI;質(zhì)粒自身成環(huán)和質(zhì)粒與目的基因的反向連接;PCR;體外擴(kuò)增目的基因利用加熱至90~95℃的高溫使DNA解旋,細(xì)胞內(nèi)復(fù)制目的基因使用解旋酶使DNA解旋;耐高溫(或具有熱穩(wěn)定性);脫分化;農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:23引用:3難度:0.6
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發(fā)布:2024/12/20 5:0:2組卷:35引用:5難度:0.6 -
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(1)獲得轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種過程中應(yīng)用的生物技術(shù)有
(2)為確保目的基因定向插入了質(zhì)粒,應(yīng)該選擇
(3)培育轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種的核心工作是圖中過程
(4)⑤過程需要用到發(fā)布:2024/12/20 2:30:1組卷:16引用:5難度:0.5 -
3.如表為5種限制酶的識(shí)別序列及切割位點(diǎn),如圖為某種質(zhì)粒和目的基因,箭頭所指為限制酶酶切位點(diǎn)?,F(xiàn)要將圖中的目的基因定向插入到質(zhì)粒中,以制備轉(zhuǎn)基因植株。下列說法正確的是( ?。?
限制酶 BamHⅠ EcoRⅠ HindⅠ NbeⅠ MunⅠ 識(shí)別序列及切割位點(diǎn) G↓CATCC G↓AATTC A↓AGCTT G↓CTAGC C↓AATTG 發(fā)布:2024/12/20 3:30:1組卷:6引用:1難度:0.6
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