某課題組實現(xiàn)了酵母細胞工廠全合成甘草酸(中藥甘草中的主要活性成分),為解決甘草及其他稀缺天然產(chǎn)物獲取過程中存在的資源短缺等問題提供新思路。為了快速檢測到甘草酸,科研人員利用細胞工程技術(shù)制備了抗甘草酸的單克隆抗體,其基本操作過程如圖所示?;卮鹣铝袉栴}:
(1)一般來說,動物細胞培養(yǎng)需要滿足其所需的營養(yǎng)條件,如培養(yǎng)基中需要含有 糖類、氨基酸、無機鹽、維生素等糖類、氨基酸、無機鹽、維生素等(答出2種)、血清等物質(zhì)。動物細胞培養(yǎng)的氣體環(huán)境是95%的空氣和5%CO2的混合氣體,其中CO2的主要作用是 維持培養(yǎng)液的pH值維持培養(yǎng)液的pH值。
(2)圖中給小鼠注射甘草酸一牛血清白蛋白結(jié)合抗原的目的是 對小鼠進行免疫處理,得到能產(chǎn)生特定抗體的B淋巴細胞對小鼠進行免疫處理,得到能產(chǎn)生特定抗體的B淋巴細胞。
(3)圖中過程②是誘導(dǎo)細胞甲和骨髓瘤細胞融合的過程,進行過程③的篩選后,能在培養(yǎng)基上生長的丙細胞是 雜交瘤細胞雜交瘤細胞;過 程④代表 對上述培養(yǎng)的雜交瘤細胞進行克隆化培育和抗體檢測對上述培養(yǎng)的雜交瘤細胞進行克隆化培育和抗體檢測,經(jīng)過多次篩選獲得細胞??;過程⑤可用 體外培養(yǎng)或?qū)⒓毎∽⑸涞叫∈蟾骨恢信囵B(yǎng)體外培養(yǎng)或?qū)⒓毎∽⑸涞叫∈蟾骨恢信囵B(yǎng)兩種培養(yǎng)方法獲得大量抗草酸磷的單克隆抗體。
【考點】單克隆抗體及其應(yīng)用.
【答案】糖類、氨基酸、無機鹽、維生素等;維持培養(yǎng)液的pH值;對小鼠進行免疫處理,得到能產(chǎn)生特定抗體的B淋巴細胞;雜交瘤細胞;對上述培養(yǎng)的雜交瘤細胞進行克隆化培育和抗體檢測;體外培養(yǎng)或?qū)⒓毎∽⑸涞叫∈蟾骨恢信囵B(yǎng)
【解答】
【點評】
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發(fā)布:2024/4/20 14:35:0組卷:8引用:2難度:0.6
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1.為實現(xiàn)對肝癌的有效治療,研究人員通過比較肝腫瘤細胞和正常細胞間的差異,篩選有效的免疫治療靶點,制備相應(yīng)單克隆抗體并構(gòu)建抗體—藥物偶聯(lián)物。
(1)檢測發(fā)現(xiàn)細胞的CLDN6蛋白能夠促進腫瘤發(fā)生,選定其作為單克隆抗體的作用靶點。CLDN6蛋白是一個跨膜蛋白,包括胞外區(qū)、跨膜區(qū)和胞內(nèi)區(qū),制備免疫小鼠所用的抗原時,應(yīng)提取
(2)將CLDN6蛋白抗原注射到小鼠體內(nèi),從該小鼠脾臟中獲取
(3)將該單克隆抗體與抗癌藥物DMI 結(jié)合構(gòu)建抗體—藥物偶聯(lián)物(CLDN6-DMI)。用不同濃度的游離DMI、CLDN6-DMI或lgG-DMI(無關(guān)抗體-DMI)分別處理高表達CLDN6細胞和低表達CLDN6細胞,檢測細胞活力,結(jié)果如圖1:
由圖可知,CLDN6-DMI能特異性殺傷高表達CLDN6細胞,依據(jù)是
(4)如圖2表示抗體—藥物偶聯(lián)物CLDN6-DMI的作用機制:由圖分析,CLDN6-DMI能特異性殺傷高表達CLDN6細胞的原因是發(fā)布:2024/12/19 7:0:1組卷:3引用:1難度:0.6 -
2.為減少鼠源單克隆抗體可能引起的副作用,某研究團隊對鼠源單克隆抗體F進行改造,制備了人—鼠嵌合抗體F′,具體流程為:提取鼠源雜交瘤細胞RNA,逆轉(zhuǎn)錄后通過PCR擴增抗體F的基因序列,將其部分序列用人的相應(yīng)抗體基因序列進行替換,再構(gòu)建表達載體,在體外制備人﹣鼠嵌合抗體F′。為檢測抗體性質(zhì),他們測定了F′單獨與抗原作用時對抗原的結(jié)合能力以及F′和F同時與抗原作用(F′與F初始濃度相同)時F′對抗原的結(jié)合能力,結(jié)果如下圖所示。下列敘述錯誤的是( )
發(fā)布:2024/12/19 1:0:1組卷:39引用:4難度:0.5 -
3.2020年諾貝爾生理學(xué)或醫(yī)學(xué)獎授予發(fā)現(xiàn)丙肝病毒的三位科學(xué)家。丙肝病毒引起的丙型肝炎可導(dǎo)致肝臟慢性炎癥壞死和纖維化,部分患者可發(fā)展為肝硬化甚至肝癌。如圖為利用小鼠甲為實驗材料研制丙肝病毒的單克隆抗體的實驗流程。下列敘述錯誤的是( )
發(fā)布:2024/12/19 6:0:1組卷:42引用:2難度:0.6
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