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動(dòng)物細(xì)胞工程能夠大量生產(chǎn)各種抗病疫苗和診斷治療腫瘤的單克隆抗體,在現(xiàn)代生物技術(shù)中發(fā)揮主要作用?;卮鹣旅娴膯栴}:
(1)利用雜交瘤細(xì)胞生產(chǎn)的單克隆抗體是通過由
產(chǎn)生單一抗體的雜交瘤
產(chǎn)生單一抗體的雜交瘤
細(xì)胞在體外或體內(nèi)培養(yǎng)獲得的抗體,寫出獲得該細(xì)胞的主要步驟(用文字和箭頭表示):
骨髓瘤細(xì)胞和免疫小鼠的B細(xì)胞融合→篩選雜交瘤細(xì)胞→篩選產(chǎn)生單一抗體的雜交瘤細(xì)胞
骨髓瘤細(xì)胞和免疫小鼠的B細(xì)胞融合→篩選雜交瘤細(xì)胞→篩選產(chǎn)生單一抗體的雜交瘤細(xì)胞

(2)在體外培養(yǎng)并獲得單克隆抗體時(shí)要向培養(yǎng)液不斷通入無菌空氣,寫出通入的無菌空氣的成分及作用
成分包括氧氣和二氧化碳,氧氣的作用是保證雜交瘤細(xì)胞的有氧呼吸,二氧化碳的作用是維持培養(yǎng)液中pH的穩(wěn)定
成分包括氧氣和二氧化碳,氧氣的作用是保證雜交瘤細(xì)胞的有氧呼吸,二氧化碳的作用是維持培養(yǎng)液中pH的穩(wěn)定

(3)雜交瘤技術(shù)制備的單克隆抗體對人體有明顯的副作用,通過單個(gè)B細(xì)胞抗體制備技術(shù)生產(chǎn)的單克隆抗體完全消除了這些副作用。該技術(shù)的一般步驟是:鑒定和分離單個(gè)B細(xì)胞→擴(kuò)增和克隆抗體基因→表達(dá)、篩選和鑒定抗原特異性抗體。擴(kuò)增和克隆的抗體基因是以B細(xì)胞中分離的mRNA為模板,經(jīng)
反轉(zhuǎn)錄
反轉(zhuǎn)錄
形成的,該過程需要
逆轉(zhuǎn)錄
逆轉(zhuǎn)錄
酶催化;表達(dá)、篩選和鑒定是通過表達(dá)載體轉(zhuǎn)入受體細(xì)胞實(shí)現(xiàn)的,構(gòu)建表達(dá)載體必需的工具酶有
限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶
限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶
,表達(dá)載體在組成上除必需有插入的抗體基因、標(biāo)記基因和復(fù)制原點(diǎn)外,還必需有
啟動(dòng)子和終止子
啟動(dòng)子和終止子
。

【答案】產(chǎn)生單一抗體的雜交瘤;骨髓瘤細(xì)胞和免疫小鼠的B細(xì)胞融合→篩選雜交瘤細(xì)胞→篩選產(chǎn)生單一抗體的雜交瘤細(xì)胞;成分包括氧氣和二氧化碳,氧氣的作用是保證雜交瘤細(xì)胞的有氧呼吸,二氧化碳的作用是維持培養(yǎng)液中pH的穩(wěn)定;反轉(zhuǎn)錄;逆轉(zhuǎn)錄;限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶;啟動(dòng)子和終止子
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布:2024/4/20 14:35:0組卷:18引用:1難度:0.7
相似題
  • 1.為實(shí)現(xiàn)對肝癌的有效治療,研究人員通過比較肝腫瘤細(xì)胞和正常細(xì)胞間的差異,篩選有效的免疫治療靶點(diǎn),制備相應(yīng)單克隆抗體并構(gòu)建抗體—藥物偶聯(lián)物。
    (1)檢測發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的CLDN6蛋白能夠促進(jìn)腫瘤發(fā)生,選定其作為單克隆抗體的作用靶點(diǎn)。CLDN6蛋白是一個(gè)跨膜蛋白,包括胞外區(qū)、跨膜區(qū)和胞內(nèi)區(qū),制備免疫小鼠所用的抗原時(shí),應(yīng)提取
     
    區(qū)基因序列用于設(shè)計(jì)抗原。
    (2)將CLDN6蛋白抗原注射到小鼠體內(nèi),從該小鼠脾臟中獲取
     
    細(xì)胞,誘導(dǎo)其與骨髓瘤細(xì)胞融合,利用
     
    篩選得到雜交瘤細(xì)胞,經(jīng)克隆化培養(yǎng)和抗體陽性檢測,多次篩選得到產(chǎn)生單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞,最終通過體內(nèi)或體外培養(yǎng)獲得大量單克隆抗體。
    (3)將該單克隆抗體與抗癌藥物DMI 結(jié)合構(gòu)建抗體—藥物偶聯(lián)物(CLDN6-DMI)。用不同濃度的游離DMI、CLDN6-DMI或lgG-DMI(無關(guān)抗體-DMI)分別處理高表達(dá)CLDN6細(xì)胞和低表達(dá)CLDN6細(xì)胞,檢測細(xì)胞活力,結(jié)果如圖1:
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    由圖可知,CLDN6-DMI能特異性殺傷高表達(dá)CLDN6細(xì)胞,依據(jù)是
     

    (4)如圖2表示抗體—藥物偶聯(lián)物CLDN6-DMI的作用機(jī)制:由圖分析,CLDN6-DMI能特異性殺傷高表達(dá)CLDN6細(xì)胞的原因是
     

    發(fā)布:2024/12/19 7:0:1組卷:3引用:1難度:0.6
  • 2.2020年諾貝爾生理學(xué)或醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)授予發(fā)現(xiàn)丙肝病毒的三位科學(xué)家。丙肝病毒引起的丙型肝炎可導(dǎo)致肝臟慢性炎癥壞死和纖維化,部分患者可發(fā)展為肝硬化甚至肝癌。如圖為利用小鼠甲為實(shí)驗(yàn)材料研制丙肝病毒的單克隆抗體的實(shí)驗(yàn)流程。下列敘述錯(cuò)誤的是( ?。?br />菁優(yōu)網(wǎng)

    發(fā)布:2024/12/19 6:0:1組卷:42引用:2難度:0.6
  • 3.為減少鼠源單克隆抗體可能引起的副作用,某研究團(tuán)隊(duì)對鼠源單克隆抗體F進(jìn)行改造,制備了人—鼠嵌合抗體F′,具體流程為:提取鼠源雜交瘤細(xì)胞RNA,逆轉(zhuǎn)錄后通過PCR擴(kuò)增抗體F的基因序列,將其部分序列用人的相應(yīng)抗體基因序列進(jìn)行替換,再構(gòu)建表達(dá)載體,在體外制備人﹣鼠嵌合抗體F′。為檢測抗體性質(zhì),他們測定了F′單獨(dú)與抗原作用時(shí)對抗原的結(jié)合能力以及F′和F同時(shí)與抗原作用(F′與F初始濃度相同)時(shí)F′對抗原的結(jié)合能力,結(jié)果如下圖所示。下列敘述錯(cuò)誤的是( ?。?img alt="菁優(yōu)網(wǎng)" src="http://img.jyeoo.net/quiz/images/202304/369/62ee43c5.png" style="vertical-align:middle" />

    發(fā)布:2024/12/19 1:0:1組卷:39引用:4難度:0.5
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